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手把手教你校準移液器!

2024-8-3  閱讀(211)

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校準移液器是確保實驗結果準確性的關鍵步驟。以下是手把手教你校準移液器的詳細步驟:

一、準備工作

  1. 工具和材料

    • 精密天平(精度至少為0.01 mg)

    • 蒸餾水或去離子水

    • 量筒(用于測量蒸餾水)

    • 校準砝碼(用于校準天平)

    • 移液器吸頭(與移液器匹配的高質量吸頭)

    • 移液器校準記錄表

    • 溫度計(測量水溫)

    • 濕度計(測量環(huán)境濕度)

    • 手套和防護裝備(確保操作無污染)

  2. 環(huán)境要求

    • 環(huán)境溫度:20°C ± 2°C

    • 環(huán)境濕度:50% ± 10%

    • 避免氣流、震動和電磁干擾

二、校準步驟

  1. 校準前的準備

    • 確保移液器清潔且干燥。

    • 檢查移液器是否需要維護或更換密封圈。

    • 在開始校準前至少30分鐘,將所有工具和材料放置在實驗室環(huán)境中,使其達到環(huán)境平衡。

  2. 天平校準

    • 打開天平,進行預熱(根據(jù)天平說明書的要求)。

    • 使用校準砝碼進行天平校準,確保天平讀數(shù)準確。

    • 確認天平校準完畢后,將天平調零。

  3. 準備蒸餾水

    • 測量并記錄水溫(理想溫度為20°C)。

    • 根據(jù)溫度,查找水的密度(參考密度表)。

  4. 吸取和稱量

    • 將吸頭浸入水中2-3毫米。

    • 緩慢平穩(wěn)地吸取水樣。

    • 等待1-2秒,確保吸頭內液體穩(wěn)定。

    • 將吸頭移到天平上方。

    • 緩慢釋放移液器按鈕,將水樣排到天平的稱量盤上。

    • 設置移液器至校準所需的體積(如10µL、100µL、1000µL)。

    • 選擇適配的吸頭,安裝到移液器上。

    • 使用正確的移液技術吸取水樣:

    • 記錄天平讀數(shù)(質量)。

  5. 重復操作

    • 對每個體積進行至少10次重復操作,記錄每次稱量的質量。

  6. 計算體積

    • 使用以下公式計算每次稱量的體積:V=mρV = \frac{m}{\rho}其中,VV 是體積(µL),mm 是質量(mg),ρ\rho 是水的密度(mg/µL,取決于水溫)。

  7. 計算誤差

    • 計算每次測量的平均體積(Vˉ\bar{V})。

    • 計算標準偏差(SD):SD=(Vi?Vˉ)2n?1SD = \sqrt{\frac{\sum (V_i - \bar{V})^2}{n-1}}其中,ViV_i 是每次測量的體積,nn 是測量次數(shù)。

    • 計算相對標準偏差(RSD):RSD=SDVˉ×100%RSD = \frac{SD}{\bar{V}} \times 100\%

    • 計算系統(tǒng)誤差(系統(tǒng)誤差 = 平均體積 - 設定體積)。

三、評估結果

  1. 精度和準確度

    • 比較計算出的平均體積和設定體積的差異(系統(tǒng)誤差)。

    • 檢查相對標準偏差(RSD),確保在移液器規(guī)定的允許范圍內。

  2. 調整移液器

    • 如果誤差超出允許范圍,根據(jù)移液器說明書進行調整(通常通過移液器上的調節(jié)螺釘)。

    • 調整后重新進行校準,直至誤差在允許范圍內。

  3. 記錄和報告

    • 填寫移液器校準記錄表,包括每次測量的體積、平均體積、標準偏差和相對標準偏差。

    • 保存校準記錄,以備將來審查。

四、后續(xù)維護

  1. 定期校準

    • 根據(jù)使用頻率和實驗要求,定期校準移液器(通常每3-6個月一次)。

  2. 日常維護

    • 每次使用后清潔移液器,特別是在處理高風險樣本后。

    • 避免粗暴操作,正確存放移液器。

通過上述步驟,可以確保移液器的精度和準確性,從而保證實驗結果的可靠性。如果在校準過程中遇到復雜或無法解決的問題,建議聯(lián)系廠家或專業(yè)技術人員進行維護和維修。


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