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杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
中級會(huì)員·2年
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二手ABI QuantStudio™ 5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀技術(shù)評估與應(yīng)用介紹
一、儀器概述
QuantStudio™ 5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀由Applied Biosystems（現(xiàn)隸屬于賽默飛Thermo Fisher Scientific）推出，是QuantStudio系列中一款定位于中通量、功能完備、界面友好的定量PCR平臺。該設(shè)備兼具96孔與384孔反應(yīng)模塊的可選性，采用LED光源和先進(jìn)的光學(xué)檢測系統(tǒng)，可滿足多種常規(guī)核酸檢測與表達(dá)分析任務(wù)。
對于采購二手設(shè)備的用戶而言，QuantStudio 5憑借結(jié)構(gòu)緊湊、性能穩(wěn)定、操作軟件直觀等特征，具有較高的再利用價(jià)值，在高校實(shí)驗(yàn)室、生物技術(shù)公司及第三方檢測機(jī)構(gòu)中仍有較大使用需求。
二、技術(shù)參數(shù)與系統(tǒng)結(jié)構(gòu)
1. 溫控性能
模塊類型：標(biāo)準(zhǔn)96孔鋁模塊（0.2 mL 反應(yīng)孔）；
升降溫速率：升溫約3.5°C/s，降溫約3.0°C/s；
溫控準(zhǔn)確性：±0.25°C；
溫度均一性：<0.4°C（在90秒保持期內(nèi)）；
熱蓋溫度范圍：30°C–105°C，可調(diào)節(jié)壓力以適配不同封膜。
2. 光學(xué)系統(tǒng)
激發(fā)光源：高強(qiáng)度LED；
檢測方式：多通道熒光檢測系統(tǒng)（最多支持6個(gè)通道）；
支持染料：FAM™, VIC®, SYBR® Green, ROX™, TAMRA™, JOE™, HEX™等；
采集方式：每循環(huán)末實(shí)時(shí)采集熒光信號，光學(xué)無接觸掃描；
校正機(jī)制：自動(dòng)進(jìn)行熒光漂移和參考染料校正（ROX為推薦參考）。
3. 兼容耗材
96孔板（0.2 mL，快裝板或獨(dú)立管）；
高透明封膜、粘蓋膜、光學(xué)蓋板；
建議使用原廠或兼容性測試合格耗材，避免因孔位不一致影響光路。
三、軟件與數(shù)據(jù)處理功能
QuantStudio Design & Analysis 軟件為該系統(tǒng)配套軟件，支持多種實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果分析模式：
1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)置
預(yù)設(shè)模板：絕對定量、相對定量、SNP分析、標(biāo)準(zhǔn)曲線、熔解曲線分析等；
自定義程序編排：設(shè)置循環(huán)參數(shù)、熒光采集時(shí)間點(diǎn)；
多用戶賬戶系統(tǒng)，便于管理大型實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)權(quán)限。
2. 數(shù)據(jù)分析
Ct值提取：自動(dòng)/手動(dòng)設(shè)定閾值；
相對表達(dá)分析：支持ΔΔCt法，歸一化目標(biāo)基因表達(dá)；
SNP判型：通過末端熒光強(qiáng)度判斷基因型；
圖形輸出：擴(kuò)增曲線、熔解曲線、熒光散點(diǎn)圖等可導(dǎo)出圖像。
3. 遠(yuǎn)程控制與云平臺
通過Thermo Fisher Cloud遠(yuǎn)程設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)、監(jiān)控運(yùn)行狀態(tài)；
可實(shí)現(xiàn)多臺設(shè)備數(shù)據(jù)集中管理與備份；
支持移動(dòng)設(shè)備端口遠(yuǎn)程訪問（部分型號升級后可實(shí)現(xiàn)）。
四、常見應(yīng)用方向
QuantStudio 5適用于基礎(chǔ)研究與應(yīng)用檢測的多種核酸實(shí)驗(yàn)：
基因表達(dá)分析
利用SYBR或TaqMan探針，評估不同處理下的mRNA表達(dá)；
可對多個(gè)目標(biāo)基因同時(shí)檢測，實(shí)現(xiàn)相對定量研究。
SNP/突變檢測
適用于單堿基突變或小范圍結(jié)構(gòu)變異檢測；
支持等位基因判型（如AA、AG、GG）；
可拓展至個(gè)體化醫(yī)學(xué)、疾病篩查研究。
微生物/病毒載量檢測
檢測細(xì)菌、病毒、支原體等特定病原體DNA/RNA；
常用于環(huán)境檢測、疫病篩查和藥效評估。
拷貝數(shù)變異分析（CNV）
精確定量染色體片段或特定位點(diǎn)的DNA拷貝數(shù)變化；
廣泛用于癌癥、遺傳病等研究。
農(nóng)產(chǎn)品/食品成分檢測
GMO成分檢測；
動(dòng)植物來源成分識別。
五、二手設(shè)備選購注意事項(xiàng)
購買二手QuantStudio 5系統(tǒng)，應(yīng)從以下維度評估設(shè)備狀態(tài)與價(jià)值：
1. 核心部件檢查
熱模塊是否升降溫穩(wěn)定（可進(jìn)行水測試）；
光學(xué)通道校準(zhǔn)是否準(zhǔn)確；
是否有報(bào)錯(cuò)或通信中斷記錄；
是否可成功運(yùn)行完整的熒光擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)。
2. 軟件與系統(tǒng)版本
是否包含正版授權(quán)的軟件（Design & Analysis）；
是否支持最新Win10系統(tǒng)或可升級；
云平臺功能是否激活；
是否提供完整操作手冊與驅(qū)動(dòng)包。
3. 外觀與配件
主機(jī)外殼是否破損、按鍵功能是否失靈；
是否提供原廠或合格的96孔模塊；
配套的反應(yīng)板托架、封膜壓蓋器是否齊全。
4. 歷史記錄
設(shè)備出廠時(shí)間與使用年限；
是否經(jīng)過正規(guī)授權(quán)商維修；
是否有校準(zhǔn)與維護(hù)記錄；
是否經(jīng)過污染清洗和溫控/光學(xué)檢測校準(zhǔn)。
六、設(shè)備適配場景評估
作為一款定位于中通量科研與臨床研究的實(shí)時(shí)熒光PCR平臺，QuantStudio 5適合以下機(jī)構(gòu)與用途：
| 機(jī)構(gòu)類型 | 典型用途 |
|---|---|
| 高校實(shí)驗(yàn)室 | 分子生物學(xué)課程教學(xué)、畢業(yè)課題實(shí)驗(yàn) |
| 醫(yī)學(xué)科研單位 | 基因表達(dá)、miRNA檢測、突變分析 |
| 第三方檢測公司 | 食品檢測、環(huán)境樣本定量、病毒篩查 |
| 生物技術(shù)公司 | qPCR試劑開發(fā)、方法學(xué)驗(yàn)證、客戶服務(wù)實(shí)驗(yàn) |
相較全新設(shè)備，二手QuantStudio 5在預(yù)算有限場景下，提供了一種可行解決方案，只要設(shè)備狀態(tài)良好并有可追溯維修記錄，能維持相當(dāng)水平的實(shí)驗(yàn)性能。
七、結(jié)語
ABI QuantStudio 5 實(shí)時(shí)定量PCR儀以其可靠的溫控系統(tǒng)、靈敏的熒光檢測機(jī)制、便捷的圖形化軟件及良好的通用性，在多種核酸檢測實(shí)驗(yàn)中被廣泛采用。若評估通過，選購二手設(shè)備可在控制成本的同時(shí)滿足實(shí)驗(yàn)需求。
在實(shí)際購置前，建議要求賣方提供以下資料以作進(jìn)一步判斷：
儀器序列號及出廠年份；
運(yùn)行日志截圖；
最近一次擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)的報(bào)告；
售后服務(wù)與運(yùn)輸保障條款。
