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荸薺皮中總黃酮和荸薺中多糖抗氧化活性研究
首先喆圖小編來給大家講講荸薺， 又名馬蹄、水栗、芍、鳧茈、烏芋、菩薺、地梨，是莎草科荸薺屬一種屬于多年生淺水性草本植物。我國荸薺的產量占世界的95%以上，長江流域以南各省均有大量栽培，是一種重要的水生植物。
荸薺皮作為荸薺加工及食用后的下腳料，占鮮荸薺質量的25％左右，資源量很大，然而絕大多數以廢物的形式丟棄或作為農戶肥料，造成環境污染和資源的極大浪費。黃酮是具有酚羥基的一類還原性化合物，在復雜反應體系中，由于其自身被氧化而具有抗氧化作用。凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均稱為多糖。
而在荸薺肉和荸薺皮中含有豐富的多糖類化合物與黃酮類化合物。目前，對于提取植物中黃酮類化合物的方法有好多種，接下來為了有效開發和利用荸薺原料、減輕環保壓力，提供一種簡單、有效的方法，實驗所需材料如下：
1、購買新鮮荸薺，削皮把皮和肉分裝處理好備用。
2、荸薺皮:收集新鮮荸薺, 剔除雜質及腐跡, 于鼓風干燥箱中80 ℃烘6 h , 再用粉碎機粉碎備用。
3、荸薺肉：收集新鮮荸薺肉切碎，于鼓風干燥箱中烘干，再用粉碎機粉碎備用。
所需試劑與儀器：
蘆丁標準品、無水乙醇、無水甲醇、苯酚、葡萄糖、濃硫酸、丙酮、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、水楊酸、過氧化氫、 三羥甲基氨基甲烷、鹽酸、鄰苯三酚（焦性沒食子酸）、1,1 - 二苯基-2- 苦基苯肼。蒸餾水、去離子水。 粉碎機、離心機、旋轉蒸發器、電熱恒溫水浴鍋、鼓風干燥箱、25ml比色管、50 mL 容量瓶、100ml容量瓶、移液管、電子天平、超聲清洗器、分光光度計、10ml試管。
肉中多糖提取： 超聲輔助提取法：蒸餾水（料液比1:25），預熱10min，超聲20min，超聲功率80W，提取溫度60℃，離心并收集長層清液，加入95%的乙醇使乙醇含量達到 70%以上然后靜置沉淀。離心收集沉淀，用無水甲醇，以除去水分和雜質，然后晾干備用。
皮中黃酮提取
乙醇提取法：乙醇60% 超聲提取50min。取荸薺皮20g，料液比1:12 提取溫度60℃離心后收集上層清液，用旋轉蒸發儀蒸干后，加水溶解，溶解*后轉移至容量瓶中。
實驗方法：溶液含量測定及溶液配制
樣品溶液含量測定：分別采用蘆丁標準曲線法、苯酚-硫酸葡萄糖標準曲線法測定樣品溶液里面黃酮與多糖的含量。
黃酮溶液：把黃酮溶解液配成25ml一定濃度梯度。(0.1,0.2,0.4,0.6,0.8 mg/ml）
多糖溶液：配成與黃酮等濃度梯度的多糖溶液。（0.1,0.2,0.4,0.6,0.8 mg/ml）
實驗操作：
1、 取5支試管加入不同濃度梯度溶液1 mL，再加入3 mL 濃度為0.04 mg/mL的DPPH 溶液，混合均勻，于室溫下避光放置40min，在波長517 nm 處測其吸光度為A1；另各取1 mL 2.4.1溶液于試管中，分別加入無水乙醇3mL，于室溫下避光放置40 min，在波長517 nm 處測其吸光度為A2；以3 mL 0.04 mg/mL DPPH 和1mL 無水乙醇反應做為參比，其吸光度記為A0
2、 清除羥基自由基能力測定 Fenton反應產生羥基自由基，H2O2/Fe2+體系通過Fenton反應產生羥基自由基 化學反應式如：H2O2+Fe2+ →·OH+OH+ Fe3+ ·OH氧化水楊酸會產生有色物質，該物質在510nm處有強吸收峰，若體系 9 里面加入清除·OH的活性物質，則就減少有色物質生成，吸光度值就會降低，吸光度值越低清除·OH效果就越好。
實驗操作：
1、取6支25ml比色管，并依次編號，每支比色管各加入9mmol/LFeSO41ml, 9mmol/L水楊酸-乙醇溶液2ml，按試管編號各加入不同濃度的標題2.4.1溶液2ml，后加入8.8mmol/L H2O22ml啟動反應，用去離子水定容至刻度，于室溫下反應1h。以去離子水代替溶液作空白對照，在510nm處測定樣品的吸光度，記錄數據。
清除超氧陰離子能力測定 對超氧陰離子的清除作用，鄰苯三酚自氧化反應方法 ：
實驗操作： 取8支洗凈干燥的25 mL比色管依次按照步驟加入
步：編號后依次加入5 mL 25℃預熱20min的pH= 8.2濃度為0.05mol/L 的Tris-HCL緩沖液；
第二步：在3-8號加入5 mL標題2.4.1溶液；
第三步：在2-8號加入2.5mL 在25℃下預熱20 min濃度為0.5 mmol·L-1 的鄰苯三酚溶液；
第四步：然后用去離子水定容至刻度。
第五步：在波長為325 nm下每隔30 s測1次吸光值。以1 號比色管作為空白。記錄數據
以上內容為荸薺在食品和藥品領域的有效應用提供理論參考，如需了解詳情請聯系喆圖客服！