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上海雅吉生物科技有限公司

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THP-1細胞CRISPR/Cas9基因編輯:開啟免疫和炎癥的新紀元

閱讀:168      發布時間:2025-5-14
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THP-1基因敲除細胞是通過CRISPR/Cas9等基因編輯技術實現的,用于研究免疫和炎癥相關機制。借助CRISPR/Cas9技術及雅吉生物的高效編輯服務,科研人員可更精準地進行基因功能研究和藥物靶點篩選,為免疫疾病與感染治療開辟新思路例如,通過設計特定的sgRNA序列并將其與Cas9酶結合,可以實現對THP-1細胞中目標基因的敲除,從而研究基因功能及其在疾病中的作用


研究者可以通過以下步驟構建基因敲除細胞:

設計并驗證sgRNA序列,確保其能夠準確引導Cas9酶切割目標基因。

構建表達載體,將sgRNA和Cas9基因克隆到載體中,并通過轉染方法導入THP-1細胞

通過篩選和克隆技術選擇成功敲除目標基因的細胞亞群。

例如,已有研究成功利用CRISPR/Cas9技術在THP-1細胞中敲除了GPR108基因,并通過PCR和測序驗證了敲除效果

。 此外,還有研究通過類似方法敲除了其他基因(如S100A9、KCNN4等),進一步揭示了THP-1細胞在免疫反應中的作用


THP-1基因敲除細胞為研究免疫調控、信號通路及疾病模型提供了重要工具

THP-1細胞基因敲除的標準流程(基于慢病毒技術)

在THP-1細胞中實現高效基因敲除,需經過以下幾個核心步驟:

1.靶向設計與載體構建:依據目標基因的關鍵外顯子區域設計sgRNA,并構建至慢病毒載體系統中;

2.慢病毒制備與細胞感染:使用HEK293T細胞進行病毒包裝,優化感染MOI并借助Polybrene提高感染效率;

3.篩選與單克隆擴增:利用抗生素篩選獲得Cas9穩定表達株及sgRNA陽性克隆,并進行單細胞克隆擴增;

4.基因敲除驗證:通過測序、酶切分析及Western blot驗證目標基因的敲除效率,確保純合克隆的獲得。


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高效率編輯:基因敲除效率高達80%,遠超市場平均水平(常規方法效率10%-30%);

全面服務體系:涵蓋從sgRNA設計到敲除驗證的全流程,支持敲除、點突變、敲入等多種定制化需求;

海量成功案例:已建立超過5000種基因編輯細胞株,廣泛應用于炎癥、腫瘤、代謝等多個研究方向;

快速響應交付:常規項目6周內交付,緊急項目可加急處理,助力科研加速。



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