總超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒 (NBT 核黃素比色法)
一、產(chǎn)品簡介： 超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase, SOD)是含金屬輔基的酶，能催化超氧化物陰離子 發(fā)生岐化作用，生成過氧化氫(H2O2)和氧氣(O2)，是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶；由于超氧自 由基是不穩(wěn)定的的自由基，壽命極短，SOD 活性一般用間接方法測定，并利用各種呈色反應(yīng)來測 定 SOD 活力，其中顯色劑有 NBT(四氮唑藍)、WST-1、WST-8 等。 雅吉生物總超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒(NBT 核黃素微板法)(Total Superoxide Dismutase Assay Kit with NBT)是一種基于 NBT 的顯色反應(yīng)，通過比色來檢測組織、細胞、植 物、血清或其它樣品中 SOD 即超氧化物歧化酶活性的試劑盒，其檢測原理是利用 SOD 抑制 NBT 在光照下的還原作用來確定酶活性大小。在有氧化合物存在的情況下，核黃素被光還原，后經(jīng)一 系列的反應(yīng)可將 NBT 還原為藍色的甲臜(formazan)，后者在 560nm 處有強吸收，SOD 可清除超氧 陰離子(O2.-)，從而抑制了甲臜的形成，反應(yīng)液藍色愈深說明超氧化物岐化酶活性愈低，反之則 酶活性愈高，據(jù)此通過比色分析就可以計算出超氧化物岐化酶活性水平。 該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。
二、產(chǎn)品組成： 名稱 50T 100T Storage 試劑(A): SOD 提取液 250ml 2×250ml RT 試劑(B): NBT 顯色液 15ml 30ml -20℃ 避光 試劑(C): 酶溶液 15ml 30ml -20℃ 避光 試劑(D): 反應(yīng)啟動液 10ml 20ml 4℃
三、自備材料： 1、生理鹽水或 PBS 2、離心機、離心管、小試管 3、分光光度計、比色杯 4、水浴鍋或恒溫箱
四、操作步驟(僅供參考)： 1、準備樣品： ①血漿或含紅細胞的樣品：從待測樣品中分理出的血清或血漿不應(yīng)有溶血，如果含有應(yīng) 去除紅細胞后檢測，如超過檢測范圍，用 SOD 提取液稀釋后檢測。血清去除紅細胞的簡 易方法如下：用抗凝管收集血液，顛倒混勻，取至少 500μl 全血，4℃ 3000g 離心 5min， 轉(zhuǎn)移上清至另一新的 1ml 離心管中，適量生理鹽水稀釋后待測；亦可采用紅細胞裂解液 去除紅細胞，如 ACK 紅細胞裂解液等
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