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HRP-CHO,辣根過氧化物酶-醛基的特點

時間:2025-6-1閱讀:58
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HRP-CHO(辣根過氧化物酶-醛基)是一種將辣根過氧化物酶(HRP)與醛基結(jié)合的化合物,廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究,以下是其詳細(xì)介紹:

合成方法

HRP-CHO的合成通常通過化學(xué)修飾實現(xiàn),將醛基引入HRP分子中。常用的方法包括高碘酸鹽氧化法:將HRP溶解在適當(dāng)?shù)木彌_液中,加入高碘酸鈉溶液,在低溫下反應(yīng)一定時間,使HRP的糖基被氧化成醛基,然后通過透析或其他純化方法去除未反應(yīng)的高碘酸鈉和其他雜質(zhì),得到HRP-CHO。此外,也有試劑盒法,如Abbkine的LliKine™辣根過氧化物酶(HRP)偶聯(lián)試劑盒,提供了一種簡單快速的方案,將HRP直接偶聯(lián)到含有自由氨基的蛋白質(zhì)、多肽或其他配體上。

特性與功能

  • 催化活性:HRP-CHO保留了辣根過氧化物酶的催化能力,能夠催化多種底物的氧化反應(yīng),如在過氧化氫存在下,催化底物產(chǎn)生顏色變化或化學(xué)發(fā)光信號。

  • 反應(yīng)性基團(tuán):醛基作為反應(yīng)性基團(tuán),能夠與氨基酸、蛋白質(zhì)或其他生物分子中的氨基發(fā)生反應(yīng),形成穩(wěn)定的共價結(jié)合,可用于標(biāo)記抗體、蛋白質(zhì)或其他生物分子,實現(xiàn)信號放大和檢測。

應(yīng)用領(lǐng)域

  • 免疫檢測:在酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)、免疫印跡(Western blot)、免疫組化等實驗中,HRP-CHO可作為標(biāo)記酶,與抗體結(jié)合,用于檢測抗原或抗體的存在和含量。

  • 生物傳感器:可用于構(gòu)建生物傳感器,通過與目標(biāo)生物分子結(jié)合,產(chǎn)生可檢測的信號變化,用于檢測生物分子、藥物和環(huán)境污染物等。

  • 化學(xué)合成:醛基可以參與多種化學(xué)反應(yīng),如縮合反應(yīng)和還原反應(yīng),為藥物合成和材料科學(xué)提供多種合成路徑。

  • 其他領(lǐng)域:HRP-CHO還可用于污水處理、食品添加劑、核酸檢測等領(lǐng)域。例如,在污水處理中,HRP-CHO可以催化污染物氧化成自由基,從而降低對環(huán)境的污染。

保存與使用

  • 保存條件:HRP-CHO應(yīng)在冷藏條件下(-20℃)保存,以保持其活性和穩(wěn)定性。避免高pH和含有氨基的物質(zhì),也應(yīng)避免光線照射。

  • 使用前處理:使用前需根據(jù)具體實驗要求進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚恚缛芙狻⑾♂尩龋⒆⒁獗苊夥磸?fù)凍融。不開啟有效期一年,活性基本不變,開啟后可能因為不同操作環(huán)境會影響有效期。

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