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產品貨號：B2883-1
存儲條件：?20℃ ，保質期3年
產品描述
熒光色素；用于DNA、染色體和核酸的染色；熒光染色法和免疫熒光技術。Hoechst 33258 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強烈的藍色熒光，對細胞的毒性較低。Hoechst 33258 常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測，也可以用于普通的細胞核染色，或常規的DNA染色。
產品性質
別名（alias） | 2'-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)- 2,5'-bi(1H-benzimidazole) trihydrochloride; 2-[2-(4-Hydroxyphenyl)-6-benzimidazoyl]-6- (1-methyl-4- piperazyl)benzimidazole trihydrochloride;HOE 33258； Hoechst 33258 |
英文別名（English synonym） | Hoechst 33258 |
CAS號（CAS NO.） | 23491-45-4 |
分子式（Formula） | C25H24N6O·3HCl |
分子量（Molecular weight） | 533.88 |
外觀（Appearance） | 黃色或綠色粉末 |
物理性狀
黃色至深黃色粉末；溶于水，黃或棕色溶液，參考濃度為9.80 - 10.20 mg/ml；熔點＞300℃。
用途
細胞遺傳學研究的常用試劑，熒光染色細胞的DNA ，插入DNA的A-T區，具有低的細胞毒性，形成膜滲透性熒光DNA鏈。用于細胞核染色時，推薦的Hoechst 33258工作濃度為0.5-10μg/ml。
配制母液
Hoechst 33258溶于水，溶解度可達10mg/ml。因此可配制成10mg/ml的母液于4℃避光保存。
注意事項
1) Hoechst 33258 對人體有一定刺激性，請注意適當防護。
2) 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。
3) 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4) 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5）本產品僅作科研用途！
使用方法
1.用PBS或合適的緩沖液制備10～50µM Hoechst 33258染色液。
2.固定的細胞或組織染色：
對于固定的細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續步驟進行Hoechst33258染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續的Hoechst 33258染色。
a)對于貼壁細胞或組織切片：加入適量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
b)吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長350nm，發射波長460nm。
3.活細胞或組織染色：
a)細胞培養物中加入適量Hoechst 33258染色液，約1/10細胞培養基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液，對于96孔板一個孔需加入100μl染色液。
b)在 37℃培養細胞 10～20 分鐘。
c)用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長350nm，發射波長460nm。
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