菌種活化就是將保藏狀態的菌種放入適宜的培養基中培養，逐級擴大培養得到純而壯的培養物，即獲得活力旺盛的、接種數量足夠的培養物菌種發酵有一般需要2-3代的復壯過程，因為保存時的條件往往和培養時的條件不相同，所以要活化，讓菌種逐漸適應培養環境。下面讓我們一起來看看細菌活化的方法吧！
一、一般菌種臨時存放及活化
1.低溫保存管應存放于-20℃ ~ -80℃之低溫條件下。
2.準備 37℃之 70﹪酒精浴槽(只能在電氣水浴槽中改放酒精，不可以火加溫，以免危險；若以 37℃水浴取代，應避免水中微生物污染)，其中事先安放小試管架，液面不可高達管塞。
3.將低溫保存管從低溫保存條件中取出，置于 37℃浴槽之小試管架上。
4.不斷輕微搖動低溫保存管，液面不可高至管塞，直至結冰溶解(約需 2 分鐘)。
二、無菌培養
1.用無菌微量吸管，從已溶解之低溫保存管 吸取 1-2滴之菌液，滴入固態培養基某一邊緣附近，以劃線法接種于培養基。
2.將接種好的培養基置于指定溫度的培養箱中培養。
三、平板劃線分離法
平板劃線分離法是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環在平板培養基表面通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養后生長繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當作待分離微生物的純種。有時這種單菌落并非都由單個細胞繁殖而來的，故必須反復分離多次才可得到純種。其原理是將微生物樣品在固體培養基表面多次作“由點到線”稀釋而達到分離目的的。
1.手持金屬接種環，用酒精燈將接種環(共約5cm)燒至火紅，并不斷來回燒烤金屬固定桿之前約10公分，等待約10秒鐘，將接種環前端輕觸培養基邊緣凝膠(無菌體部份)，待接種環冷卻后，以環沾黏菌滴，由培養基邊緣向中央輕輕橫劃緊接的并行線，直到涵蓋1/3培養基為止。
2.灼燒接種環，待數秒冷卻后，旋轉培養基自I區涂布的邊緣再橫劃數條線到未接種的區域。
3.重復2的動作完成。
4.灼燒接種環，將接種環歸位。
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