細(xì)胞培養(yǎng)物污染往往是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室中最常見的問題，有時(shí)會(huì)造成非常嚴(yán)重的后果。細(xì)胞培養(yǎng)污染物可分為兩大類，一類是化學(xué)污染物，如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)，包括內(nèi)毒素、增塑劑和洗滌劑，另一類是生物污染物，如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒和支原體，以及其他細(xì)胞系的交叉污染。那么我們?cè)?/span>如何分辨各種細(xì)胞污染呢？讓我們一起來(lái)看看吧！
一、細(xì)菌污染
肉眼觀察特點(diǎn)：細(xì)菌污染時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)基可能在幾個(gè)小時(shí)呈現(xiàn)混濁，爆發(fā)很快。有時(shí)稍加震蕩，便會(huì)有很多混濁物漂起。
在低倍顯微鏡下，細(xì)菌以細(xì)小顆粒的形式出現(xiàn)在細(xì)胞之間，在高倍顯微鏡下觀察可以分辨出單個(gè)細(xì)菌的形狀。
二、真菌污染
常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌、白色念珠菌和酵母菌。真菌污染時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)液一般不會(huì)變渾濁，但在顯微鏡下可以觀察到各種形狀的菌絲。像念珠菌和酵母菌則會(huì)呈卵圓形散在細(xì)胞周邊和細(xì)胞之間。
肉眼觀察特點(diǎn)：真菌污染最短3天才能長(zhǎng)出橢圓形的霉斑。霉斑往往會(huì)漂浮在培養(yǎng)液表面，隨著時(shí)間逐步擴(kuò)大。真菌污染后，細(xì)胞生長(zhǎng)變慢，最后由于營(yíng)養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細(xì)胞脫落死亡。真菌生長(zhǎng)的比較慢，不那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
三、病毒污染
組織細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如果沒有除去潛在的病毒，就會(huì)產(chǎn)生病毒污染。目前，從原代猴腎細(xì)胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒。
盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng)，但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此，潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。
五、交叉污染
雖然不如微生物污染普遍，但許多細(xì)胞系與HeLa以及其他快速生長(zhǎng)細(xì)胞系之間的廣泛交叉污染已經(jīng)是一個(gè)明確的問題，會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的后果。
在進(jìn)行多種細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)，所用器具要嚴(yán)格區(qū)分。
在進(jìn)行換液或傳代操作時(shí)，注射器和滴管不要觸及細(xì)胞培養(yǎng)瓶瓶口，以免把細(xì)胞帶到培養(yǎng)液中污染其他細(xì)胞。
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