DNA的提取可以簡單的分為裂解和純化兩大步驟,裂解是破壞樣品細胞結構,從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過程,純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分,如蛋白質、鹽及其它雜質分離的過程。那么該如何選擇DNA提取方法呢?讓我們一起來看看吧!
一、酚氯仿抽提法
酚氯仿抽提是去除蛋白質的有效手段,但如果蛋白質含量超過了其飽和度,裂解體系中的蛋白質就不會被一次性去除,需要進行多次反復抽提,而每次的抽提均會導致核酸的損失。酚氯仿抽提的優勢是成本低廉,對實驗條件要求較低。二、高鹽沉淀法
高鹽沉淀法是酚氯仿抽提方法的一個變種,其省略了酚氯仿抽提操作的麻煩,并且克服了酚氯仿抽提方法的缺點,只是得到DNA的純度不夠穩定。
三、柱式法
過柱法利用某些固相介質,在某些特定的條件下,選擇性地吸附核酸而不吸附蛋白質及鹽的特點,實現核酸與蛋白質及鹽的分離,是目前試劑盒提取廣泛使用的方法。
離心柱法DNA提取它的優點是比傳統的酚氯法提取的純度高,有利于RNA保護,而且能進行微量操作,以其低廉的價格和相對便捷的操作,漸逐取代了傳統DNA提取方法,被高校科研所等市場普遍接受。
四、磁珠法
該方法將純化介質包被在納米級的磁珠表面,通過介質對DNA的吸附,在外加磁場的作用下使DNA附著于磁珠并定向移動,從而達到核酸與其它物質分離的目的。磁珠法的優勢是高質量、高通量滿足如今對核酸提取效率的需求;靈敏度高(只需微量的樣本);分離速度快(磁場分離只需幾秒鐘);
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