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PCR管實驗過程中的注意事項

閱讀:2079      發布時間:2022-10-27
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  PCR管用聚丙烯(MDPP)配方改良而成,使得產品達到比同類產品更好的導熱率,快速的反應和均一的熱導性。使用高精密小通量模具生產PCR耗材,確保塑料原料在模具中的散布均一性和同步性。從而使每一個PCR產品具有相似性和均一度。
 
  實驗證明:影響PCR反應的關鍵因素中:PCR儀,酶,鎂離子,緩沖液,引物退火溫度等等,其中PCR耗材的質量和PCR儀器溫度準確性與實驗結果密切相關,PCR管和PCR板要求具友極薄的管壁和高度均一性。PCR管壁的厚薄會影響傳熱及傳熱速度。管體的顏色,均一性,透光度等都會直接影響到PCR,尤其是aPCR(定量PCR)的結果。
 
  PCR管實驗過程中的注意事項:
 
  1、戴一次性手套,若不小心濺上反應液,立即更換手套。
 
  2、使用一次性吸頭,嚴禁與PCR產物分析室的吸頭混用,吸頭不要長時間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染。
 
  3、避免反應液飛濺,打開反應管時為避免此種情況,開蓋前稍離心收集液體于管底.若不小心濺到手套或桌。上,應立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面。
 
  4、進口pcr管操作多份樣品時,制備反應混合液,先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好,然后分裝,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應的準確度。
 
  5、加入反應模板,加入后蓋緊反應管。
 
  6、操作時設立陰陽性對照和空白對照,即可驗證PCR反應的可靠性,又可以協助判斷擴增系統的可信性。
 
  7、盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,由于加樣器容易受產物氣溶膠或標本DNA的污染,使用可替換或高壓處理的加樣器,如沒有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過程中加樣器應該專用,不能交叉使用,尤其是PCR產物分析所用加樣器不能拿到其它兩個區。
 
  8、重復實驗,驗證結果,慎下結論。

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