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液相色譜-紫外檢測法測定水產(chǎn)品中組胺含量
液相色譜-紫外檢測法測定水產(chǎn)品中組胺含量
生物胺是一類含氮的有機化合物，主要有脂肪類、芳香類或雜環(huán)類。其中脂肪族生物胺包括腐胺、尸胺、精胺、亞精胺等，芳香族包括酪胺、*等，雜環(huán)類包括組胺、色胺等。在人和動物身體細(xì)胞中，存在適量的生物胺比如組胺、色胺、精胺等，在調(diào)節(jié)機體生長、增強機體新陳代謝活力、控制血壓、消除自由基等方面具有明顯作用。生物胺在很多食品中都存在，尤其是蛋白質(zhì)含量豐富的食品，主要包括動物源食品和發(fā)酵類食品。生物胺具有一定的毒性作用，各種胺類毒性大小不同，其中組胺對人體健康的影響zui大。
組胺又稱組織胺，是一種過敏性毒yao，化學(xué)式是C5H9N3，分子量是111，大量食用后會引起不良反應(yīng)。水產(chǎn)品中的組胺主要是魚肉在腐朽過程中其機體中的組胺酸通過其中存在的微生物所產(chǎn)生的組胺酸脫羧酶的脫羧作用而生成。組胺中毒是水產(chǎn)食品存在的主要安全問題之一，全國各地尤其是沿海地區(qū)組胺中毒事件時有發(fā)生。當(dāng)有機體攝入組胺超過100mg時，即可引起過敏性食物中毒，口服8-40mg組胺將引起輕微中毒癥狀，超過40mg產(chǎn)生中等中毒癥狀，如果超過100mg將產(chǎn)生嚴(yán)重中毒癥狀。美國食品藥品就愛你度管理局過對爆發(fā)組胺中毒的大量數(shù)據(jù)的研究，確定組胺的危害作用水平為500mg/kg。歐盟規(guī)定鯖科魚類中組胺含量不得超過100mg/kg，其他食品中組胺不得超過100mg/kg，酪胺不得超過100-800mg/kg。
目前組胺的測定方法有很多GB/T 5009.45-2003中的水產(chǎn)品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法、GB/T 5009。208-2008中的食品中生物胺含量的測定和GB/T20768-2006中的魚和蝦中有毒生物胺的測定、液相色譜-紫外檢測法等方法以及相關(guān)的文獻(xiàn)中提到了偶氮顯色法、苯甲酰氯衍生液相色譜法、單酰氯衍生液相色譜法、毛細(xì)管電泳法、離子色譜法、波層色譜法和生物電化學(xué)法。液相色譜法由于其具有分析速度快、注效高、檢測靈敏度高、定量分析準(zhǔn)確等特點，基本取代了其他方法，是目前生物胺含量分析測定的主要手段。衍生方法主要有柱前衍生和柱后衍生，常用的衍生化試劑有領(lǐng)苯二甲醛、丹磺酰氯、偶氮試劑和苯甲酰氯等，領(lǐng)苯二甲醛存在衍生物不穩(wěn)定等不足，苯甲酰氯不溶于水，衍生效果差，偶氮顯色法容易受到基質(zhì)中雜質(zhì)的干擾，影響測定結(jié)果。丹磺酰氯具有較理想的衍生效果和穩(wěn)定時間。而有些標(biāo)準(zhǔn)中鹽溶液作為流動相，會對分析柱造成損害。本研究綜合了相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)，以鯖魚為代表對液相色譜法測定水產(chǎn)中組胺含量進(jìn)行了方法改進(jìn)。
儀器準(zhǔn)備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時控制數(shù)臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等，實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
應(yīng)用領(lǐng)域
化合物檢測、法醫(yī)毒物分析、蛋白質(zhì)組學(xué)食品檢測、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析
質(zhì)譜條件：
進(jìn)樣量 | 20μl |
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柱溫 | 35℃ |
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流動相流速 | 1.0ml/min |
檢測波長 | 254nm |
測定結(jié)果：
