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液相色譜儀測定食品中八種人工著色劑色素的含量
閱讀：1939 發布時間：2016-12-19
著色劑又稱食品色素，是以食品著色為主要目的，使食品賦予色澤和改善食品色澤的物質。目前世界上常用的食品著色劑有60余種，我國允許使用的有46種，按來源來分，可把著色劑分為兩大類：一為天然著色劑二為人工合成著色劑。
生產企業違禁添加著色劑、甜味劑，長期食用此類產品將嚴重危害人體健康。實驗用乙醇-氨水提取樣品中的人工合成著色劑，利用固相萃取柱凈化，采用液相色譜儀（二級陣列檢測器）測定樣品中檸檬黃、莧菜紅、靛藍、胭脂紅、日落黃、亮藍、赤蘚紅等人工合成著色劑的含量。
實驗儀器
LC600A梯度液相色譜系統（二級陣列檢測器）（南京科捷分析儀器有限公司）、離心機、固相萃取裝置等。
樣品處理：
1.提取 將試樣用勻漿機打碎，再攪拌均勻，準確稱取2.00 g樣品，裝入離心管中。加10 mL無水乙醇-氨水溶液，渦旋0.5 min，再3000rpm離心10 min，將上清液倒入塞有脫脂棉的玻璃漏斗中過濾，將剩余殘渣再重復操作三次，將收集的濾液（約40mL）置于80℃水浴中濃縮至約2 mL。
2.凈化 將濃縮后的試樣溶液用2%的氨水調成pH=8后，轉移到預處理過的固相萃取柱中，依次用3 mL pH=8的水和3 mL pH=8的50%甲醇以小于2ml/min的流速清洗，棄去全部流出液。再用10mL鹽酸-乙醇溶液（1+9）將著色劑洗脫出固相萃取柱，收集洗脫液，用氨水中和，80℃水浴濃縮至近干，冷卻后用50%的甲醇溶液溶解并定容至10mL，過濾后取續濾液待測。
色譜條件：
| 色譜柱 | C18柱（250mm×4.6mm，5μm） | ||
| 流動相 | A：甲醇；B：乙酸銨溶液（0.02mol/L） | ||
| 流速 | 1.0ml/min | ||
| 進樣量 | 10μL | ||
| 檢測波長 | 檸檬黃428nm、莧菜紅521nm、靛藍608nm、胭脂紅509nm、日落黃483nm、誘貨紅507nm、亮藍625nm、赤蘚紅529nm | ||
| 梯度洗脫程序 | 時間min | 甲醇% | 乙酸銨溶液% |
| 0 | 20 | 80 | |
| 5 | 35 | 65 | |
| 10 | 80 | 20 | |
| 16 | 80 | 20 | |
| 17 | 20 | 80 | |
| 2 | 20 | 80 | |