纖維化的定量化
■什么是纖維化？
纖維化是指組織內(nèi)的結(jié)締組織發(fā)生異常增殖的現(xiàn)象。可發(fā)生于心臟、肺、肝臟、腎臟、胰腺等除腦部以外的全身幾乎所有主要臟器，發(fā)生纖維化的臟器最終導致功能衰竭。
發(fā)生心肌纖維化后，可能引起舒張性心衰，甚至引起心律不齊或猝死。肺部纖維化將引起間質(zhì)性肺炎，使肺部間質(zhì)變厚變硬，導致肺部收縮，難以吸入氧氣，在平靜狀態(tài)也有可能發(fā)生呼吸停止。肝臟的纖維化將導致肝硬化。另外，引起纖維化的纖維芽細胞還大量存在于癌間質(zhì)組織內(nèi)，目前正在推進其與癌癥的相關性研究。發(fā)生纖維化的臟器難以恢復原狀，因此及早發(fā)現(xiàn)并抑制其發(fā)展尤為重要。為評價纖維化的進展程度，正在開發(fā)利用作為標記產(chǎn)生的膠原蛋白或血小板數(shù)、糖鏈生物標記等方法。
另外基于對纖維化缺乏有效的治療藥物，一旦發(fā)病其結(jié)果不可逆的特點，同時也從再生醫(yī)療的觀點著手開展研究。
■纖維化機理
在正常組織中，因組織障礙發(fā)生炎癥反應后，在巨噬細胞引起免疫應答的同時，將分泌TGF-β等炎癥因子。炎癥因子可促進纖維芽細胞的增殖及向肌成纖維細胞的分化。肌成纖維細胞產(chǎn)生構(gòu)成細胞外基質(zhì)的膠原蛋白，通過供應足量的修復材料，可治愈炎癥部位。
發(fā)生慢性炎癥后，因過度的損傷修復反應，肌成纖維細胞不吸收膠原蛋白而導致沉淀，使纖維化繼續(xù)發(fā)展，最終導致臟器的功能衰竭。
■纖維化率的測量事例
在以下實例中，利用基恩士一體化熒光顯微成像系統(tǒng)BZ-X800，觀察心臟并測量其纖維化率。在纖維化部位觀察中，低倍率下圖像不夠清晰，無法進行高精度測量。而在高倍率下，則在不同的觀察位置，測量結(jié)果發(fā)生變化，無法進行穩(wěn)定的測量。
因此，為了在保持分辨率的同時拍攝整體圖像，通過創(chuàng)建拼接圖像，可以穩(wěn)定地獲得高精度結(jié)果。
利用細胞計數(shù)功能，能夠輕松測量纖維化發(fā)生部位占整體組織的面積率。
另外，通過保存用于測量纖維化率的測量條件，可對其他標本進行批量測量。
能夠簡單且高再現(xiàn)性地評價多個組織間纖維化率差異。
■如果引進一體化熒光顯微成像系統(tǒng)BZ-X800
· 針對無法完整進入視野的大切片，一邊移動載物臺一邊獲取圖像，將拍攝的圖像拼接起來，即可合成1張高分辨率圖像。
· 即使標本有傾斜、高低差，也能在Z方向獲取多張圖像，只從拍攝的圖像中合成焦點對準的部分，可構(gòu)建焦點對準整個標本的全幅對焦圖像。
· 使用混合細胞計數(shù)，只從整個切片中提取纖維化的部分，可自動計算比例。
· 根據(jù)在混合細胞計數(shù)中使用的提取條件，使用宏細胞計數(shù)，可批量處理多個圖像。
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