成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

您好, 歡迎來到化工儀器網

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

15021281375

Download

首頁   >>   資料下載   >>   己糖激酶(hexokinase,HK)試劑盒說明書

優利科(上海)生命科學有...

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

己糖激酶(hexokinase,HK)試劑盒說明書

閱讀:422      發布時間:2023-10-24
分享:

己糖激酶(hexokinaseHK)試劑盒說明書

                                          微量法 100/96

 

   正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義

HKEC 2.7.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是葡萄糖分解過程中的第一個關鍵酶,催化葡萄糖轉化為6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途徑的交叉點。

 

測定原理

HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPHNADPH340nm有特征吸收峰。

 

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

 

試劑的組成和配制

提取液:100mL×1瓶,4保存;

試劑一:液體20mL×1瓶, 4保存;

試劑二:粉劑×1瓶,4保存;

試劑三:粉劑×1支,-20保存;

 

樣本的前處理

1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測。

2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測。

3、血清(漿)樣品:直接檢測。

 

測定步驟

1、  分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。

2、  樣本測定

1)在試劑二中加入18mL試劑一充分溶解,置于37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴5min用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

2)在試劑三中加入1mL試劑一,充分溶解待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

3)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本、10μL試劑三和180μL試劑二,混勻,立即記錄340nm20s時的吸光值A1 5min20s后的吸光值A2計算ΔA=A2-A1

注意:不同勻漿組織中HK活力不一樣,做正式試驗之前請做1-2只預試,若ΔA>0.5,則說明組織活力太

 

高,必須用提取液稀釋成適當濃度勻漿上清液(計算公式中乘以相應稀釋倍數),或縮短反應時間至2min,使ΔA<0.5,以提高檢測靈敏度。

 

HK活性計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、血清(漿)HK活性

單位的定義:每毫升血清(漿)在每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。

HKnmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷V÷T=643×ΔA

2、組織、細菌或細胞中HK活性

1)按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。

HKnmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=643×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。

HKnmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=643×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。

HKnmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(500×V÷V樣總) ÷T=1.286×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 LεNADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,1cmV樣:加入樣本體積,0.01 mLV樣總:加入提取液體積,1 mLT:反應時間,5 minCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本質量,g500:細菌或細胞總數,500萬。

 

b.96孔板測定的計算公式如下

1、血清(漿)HK活性

單位的定義:每毫升血清(漿)在每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。

HKnmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷V÷T=1286×ΔA

2、組織、細菌或細胞中HK活性

1)按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。

HKnmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。

HKnmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W× V÷V樣總) ÷T=1286×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。

HKnmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(500×V÷V樣總)÷T=2.572×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 LεNADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cmd96孔板光徑,0.5cmV樣:加入樣本體積,0.01 mLV樣總:加入提取液體積,1 mLT:反應時間,5 minCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本質量,g500:細菌或細胞總數,500萬。

提供商

優利科(上海)生命科學有限公司

下載次數

4次

資料大小

34KB

資料類型

WORD 文檔

資料圖片

點擊查看

瀏覽次數

422次

產品展示

會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 男人把女人桶的很爽视频| 年轻性感的妈妈韩国电影| 国产一区二区三区高清av| 久久久久久亚洲av黄床| 亚洲精品一区二区三区四区五区| 欧美一级大片在线播放| 欧美日韩亚洲视频一区二区| 亚洲精品AV中文字幕在线| 欧洲亚洲精品A片久久99动漫| 国产精品第1页在线观看| 日本欧美韩国在线| 日韩成人毛片高清视频免费看| 男女做爰猛烈吃奶摸A片| 狠狠躁日日躁夜夜躁A片| 国产第一视频在线观看| 成人另类高清在线| 亚洲巨乳日本无码一二三区| 亚洲欧美日韩国产视频| 精品久久久久久久国产| 亚洲伊人伊成久久人综合网| 中文字幕无码亚洲八戒| 神马电影院888午夜理论不卡| 国产亚洲精品久久久久久禁果TV| 国产熟妇搡BBBB搡BBBB| 桃色AV久久无码线观看| 日韩精品无码一区AAA片| 久久精品黄AA片一区二区三区| 亚州欧美日韩久久精品| 亚洲精品久久久久久动漫| 欧美日韩精品在线视频播放| 中文字幕忍不住勃起| 欧美日韩色情FTP在线播放| 在线无码中文字幕一区| 苹果视频社区下载| 精品亚洲一区二区三区在线播放| AV蜜臀在线网站| 国产精品人妻一区二区99| 国产乱子经典视频在线观看| 久久久久久久久久免免费精品| 久久久这里只有免费精品2018| 乖H1V1高干内射|