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土壤總磷/有機磷/無機磷含量測定試劑盒說明書

閱讀:445      發布時間:2023-10-12
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土壤總磷/有機磷/無機磷含量測定試劑盒說明書

                                           微量法 100T/96S

 

 

   :正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:                           

土壤總磷包括有機磷和無機磷,其中無機磷能夠直接被植物利用。土壤有機磷經過礦化分解而轉化為無機磷。同時測定土壤總磷、有機磷和無機磷,可以全面反映土壤磷營養狀況。

 

測定原理:

利用鉬藍法定磷。取一份土樣,通過浸提法測定土壤無機磷含量;另外取一份土樣,經高溫灼燒后,土壤有機磷轉化為無機磷,測得土壤總磷含量;總磷含量減去無機磷含量,即可計算出有機磷含量。

 

自備儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、可調式水浴鍋,分析天平、可調式移液器、550℃高溫電爐、蒸餾水、100目篩子(可更小)。

 

試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。臨用前用蒸餾水稀釋10倍后再用。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前配制,加入8mL蒸餾水,充分溶解后加入4mL試劑二,混勻。

標準品:液體×1支,20 μmol/L無機磷標準品,4℃保存。

 

土壤不同形態磷提取:

1.無機磷:取通過100目篩子的風干土樣0.01g,轉移到1mL離心管,加入1mL試劑一,震蕩混勻,然后置于45℃水浴1h8000g25離心10min,取上清液一,用于無機磷含量測定。

2.總磷提取:取通過100目篩子的風干土樣550℃灼燒1h,冷卻后稱取約0.01g,轉移到1 mL離心管,加入1mL試劑一,震蕩混勻,然后置于45℃水浴1h8000g25離心10min,取上清液二,用于總磷含量測定。

 

測定步驟:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節波長到660 nm,蒸餾水調零。

2.打開水浴鍋,調節溫度到40℃

3. 空白管:EP管,依次加入100μL蒸餾水,100μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A空白管。

4. 標準管:EP管,依次加入10μL標準液,90μL蒸餾水,100μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A標準管。

5. 測定管:EP管,依次加入10μL上清液一或者上清液二,90μL蒸餾水,100μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度,記為A測定管。

注意:空白管和標準管只需測定一次。

 

土壤磷含量計算:

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1.土壤無機磷含量(μmol /g 干重)=[C標準液×(A測定-A空白)÷(A標準-A空白)]×V÷W

                          =0.02×(A測定-A空白)÷(A標準-A空白)÷W

C標準液:20 μmol/L W:土壤樣品質量,g V總:上清液一總體積,1 mL=0.001 L

2.土壤總磷含量(μmol /g 干重)=[C標準液×(A測定-A空白)÷(A標準-A空白)]×V÷W

                        =0.02×(A測定-A空白)÷(A標準-A空白)÷W

C標準液:20 μmol/LW:土壤樣品質量,gV總:上清液二總體積,1mL=0.001 L

3.土壤有機磷(μmol /g干重)=土壤總磷-土壤無機磷

4. 

b. 使用96孔板測定的計算公式如下

1.土壤無機磷含量(μmol /g 干重)=[C標準液×(A測定-A空白)÷(A標準-A空白)]×V÷W

                          =0.02×(A測定-A空白)÷(A標準-A空白)÷W

C標準液:20 μmol/L W:土壤樣品質量,g V總:上清液一總體積,1 mL=0.001 L2. 土壤總磷含量(μmol /g 干重)=[C標準液×(A測定-A空白)÷(A標準-A空白)]×V÷W

                        =0.02×(A測定-A空白)÷(A標準-A空白)÷W

C標準液:20 μmol/LW:土壤樣品質量,gV總:上清液二總體積,1mL=0.001 L

3.土壤有機磷(μmol /g 干重)=土壤總磷-土壤無機磷

 

注意事項:

試劑三配制過程中,可能會產生黑色固體,其不影響結果,注意吸取時不要將黑色固體吸入。

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優利科(上海)生命科學有限公司

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