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土壤全硼試劑盒說明書

閱讀:424      發(fā)布時間:2023-10-07
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土壤全硼試劑盒說明書

微量法100T/96S

 

   :正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

硼是植物生長發(fā)育必需的七種微量營養(yǎng)元素之一,土壤中硼素的含量高低直接影響著植物的生長狀況。

 

測定原理:

硼與甲亞胺在弱酸條件下形成棕黃色配合物,在420nm有特征吸收峰。

 

自備實驗用品及儀器:

天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、馬弗爐、微量石英比色皿/96孔板

 

試劑組成和配制:

提取劑:粉劑×1瓶,4℃保存。

提取液:液體100mL×4瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加8mL水溶解,加0.125mL乙酸。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加4mL蒸餾水溶解。

 

樣本處理:

新鮮土樣風干,過100目篩,按照土壤質量(g):提取劑質量(g)14的比例(建議稱取約0.1g土樣,加入0.4g提取劑)緩慢加入提取劑于坩堝中,邊加邊攪拌均勻,然后在馬弗爐中550℃熔融10min,然后在920℃熔融30min,趁熱取出坩堝,將熔融物轉入燒杯,邊攪拌邊加4mL提取液,必要時加蓋,防止溶液濺出,溶解30min后,5000g 25℃離心10min,取上清液待測。

 

測定操作表:

 


空白管

測定管

樣本(μL


40

試劑一(μL

80

80

試劑二(μL

40

40

H2OμL

80

40

充分混勻,25℃黑暗中靜置1h

微量石英比色皿/96孔板,蒸餾水調零,測定420nm處吸光值A,分別記為A空白管和A測定管,△A=A測定管-A空白管

 

計算公式:

 

 

 

a.  用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線:y = 0.3897x - 0.2359R2 = 0.9995

全硼含量(mg/kg=(△A+0.2359÷ 0.3897×V反總÷W×V÷V樣總)

                 = 51.32×(△A+0.2359÷W

V反總:反應總體積,0.2mLV樣:反應體系中加入樣本體積,0.04mLV樣總:加入提取液體積,4mLW:樣本質量,g

 

a.        96孔板測定的計算公式如下

標準曲線:y = 0.1949x - 0.2359R2 = 0.9995

全硼含量(mg/kg=(△A+0.2359÷ 0.1949×V反總÷W×V÷V樣總)

                 =102.64×(△A+0.2359÷W

V反總:反應總體積,0.2mLV樣:反應體系中加入樣本體積,0.04mLV樣總:加入提取液體積,4mLW:樣本質量,g

 

注意事項:

1.       配制好的試劑二4℃保存不可超過7天。

2.       顯色時嚴格控制溫度并且避光,以免顯色劑見光分解。

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優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司

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