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土壤汞(S-Hg)濃度檢測試劑盒說明書

閱讀:409      發布時間:2023-09-22
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土壤汞(S-Hg)濃度檢測試劑盒說明書

                                               微量法100T/96S

 

 

注   意 :正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

土壤汞污染能夠通過食物鏈傳遞和富集,對植物、動物和人類健康產生威脅。礦山開發、工業加工、農業生產和生活垃圾常常造成土壤汞污染,因此評價和防止土壤重金屬污染常常需要測定土壤汞含量。

 

測定原理:

土壤經消化后,汞以Hg2+離子形式存在;Hg2+能與二硫腙生成橙色絡合物,溶于三氯jia烷后,在490nm測定吸光度,即可計算S-Hg含量。

 

自備儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、可調式移液槍、100目篩(可更小)、濃硫酸、濃鹽酸、濃硝酸、三氯jia烷和蒸餾水。

 

試劑組成和配制:

標準品:液體×1支,4nmol/mL Hg標準液,4℃保存。

試劑一:自備。在該試劑瓶中加入52mL蒸餾水,36 mL濃鹽酸,12mL濃硝酸,混勻,4℃避光保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加18.4 mL蒸餾水充分溶解。

試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加3 mL蒸餾水充分溶解。

試劑四:粉劑×1支,4℃保存。臨用前加1.5 mL蒸餾水充分溶解。

試劑五:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加5.2 mL蒸餾水充分溶解。

試劑六:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加20 mL三氯jia烷充分溶解。

 

S-Hg檢測:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,體積波長到490 nm,三氯jia烷調零。

2. 樣品管:風干的土壤,過100目篩后精確稱取0.1 g左右,裝入EP管;加入1 mL試劑一,充分混勻后沸水浴消化60 min。取出冷卻后室溫8000g離心10min,吸取20 μL上清液加入新的EP管;再先后加入180 μL蒸餾水和20 μL濃硫酸,混勻;最后加入180 μL試劑二,混勻后40℃水浴24h,期間震蕩數次。

2. 標準管:取EP管,加入20 μL標準液,180 μL蒸餾水和20 μL濃硫酸,混勻;最后加入180 μL試劑二,混勻后40℃水浴24h,期間震蕩數次。

3. 加入20 μL試劑三,震蕩直到無色;開蓋靜置30min,期間搖蕩數次,以排出氣體。

4. 加入10 μL試劑四,充分混勻后靜置5min;加入50μL試劑五,蓋緊后震蕩至少1min,靜置10min以分層。

5. 小心吸取20 μL下層溶液,加入200 μL試劑六,震蕩使無色,靜置10 min以分層。

6. 小心吸取140 μL下層溶液,加入微量玻璃比色皿/96孔板,于490nm處比色,記錄各管吸光值。記為A樣品管和A標準管。

注意:標準管只需測定一次。

 

S-Hg濃度計算公式:

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

Hg(nmol Hg/g 干重)=[C標×(A測定管÷A標準管)]×V總÷V樣÷W

                     =200×(A測定管÷A標準管)÷W

C標:標準液濃度,4 nmol/mL Hg;V總:上清液總體積,1 mL;W:土樣質量,g;V樣:加入上清液體積,20 μL=0.02 mL。

b.使用96孔板測定的計算公式如下

Hg(nmol Hg/g干重)=[C標×(A測定管÷A標準管)]×V總÷V樣÷W

                     =200×(A測定管÷A標準管)÷W

C標:標準液濃度,4 nmol/mL Hg;V總:上清液總體積,1 mL;W:土樣質量,g;V樣:加入上清液體積,20 μL=0.02 mL。

 

注意事項:

1、試劑一有刺激性氣味,易揮發,實驗過程中應注意佩戴口罩和手套,使用完立即蓋好蓋子,以免試劑不夠;

2、測定過程中需加入濃硫酸,加濃硫酸時需注意,避免濺到皮膚或眼睛上;

3、靜置分層后,用1mL移液槍,排除空氣后,輕輕插入下層溶液中,緩慢吸取下層溶液。


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優利科(上海)生命科學有限公司

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