成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

您好, 歡迎來到化工儀器網

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

15021281375

Download

首頁   >>   資料下載   >>   4-香豆酸:輔酶 A 連接酶( 4-coumarate:CoA ligase,4CL) 試劑盒說明書

優利科(上海)生命科學有...

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

4-香豆酸:輔酶 A 連接酶( 4-coumarate:CoA ligase,4CL) 試劑盒說明書

閱讀:532      發布時間:2023-09-01
分享:

4-香豆酸:輔酶 A 連接酶( 4-coumarate:CoA ligase,4CL)

試劑盒說明書

 

微量法 100 管/48 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:

4CL 是連接苯丙酸途徑與木質素特異合成途徑的關鍵酶,主要催化肉桂酸生成相應的肉桂酸輔酶 A 酯,是合成木質素與其他苯丙烷類化合物的代謝流向調控點。該酶主要存在于高等植物、酵母和菌類中,研究該酶可以探討多種生物細胞發育過程中木質素沉積的代謝機理, 為減少水果石細胞含量而提高其品質提供依據。

測定原理:

4CL 催化 4-香豆酸和 CoA 生成 4-香豆酸 CoA,在 333nm 下測 4-香豆酸 CoA 生成速率,即可反映 4CL 活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:100mL×1  瓶,4℃保存;

試劑一:液體 25 mL×1 瓶, 4℃保存; 試劑二:粉劑×2 瓶,-20℃保存;

粗酶液提取:

細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量

(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟:

1、 分光光度計或酶標儀 40℃預熱 30min 以上,調節波長至 333nm,蒸餾水調零。

2、 準備 96 孔 UV 板一塊(非普通酶標板,普通酶標板只能透過可見光,不能透過紫外光, 檢測波長小于 340nm 務必使用 UV 板)。

3、 樣本測定

(1)   在試劑二中加入 5mL 試劑一充分溶解混勻,置于 40℃水浴預熱 10min;現配現用( 配好后 24h 內用完);

(2)   對照管:在微量石英比色皿或 96 孔 UV 板中加入 10μL 樣本和 190μL 試劑一,混勻,立即記錄 333nm 處 40℃反應 30min 后的吸光值A1。

(3)   測定管:在微量石英比色皿或 96 孔 UV 板中加入 10μL 樣本和 190μL 試劑二,混勻,立即記錄 333nm 處 40℃反應 30min 后的吸光值 A2,計算 ΔA=A2-A1。每個測定管設一個對照管。

 

4CL 活性計算:

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

(1) 按樣本蛋白濃度計算:

單位定義:每 mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol4-香豆酸輔酶A 定義為一個酶活力單位。

4CL(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×10 9]÷(V 樣×Cpr) ÷T= 31.75×ΔA÷Cpr

(2) 按樣本鮮重計算:

單位定義:每 g 組織每分鐘生成 1 nmol 4-香豆酸輔酶A 定義為一個酶活力單位。

4CL(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×10 9]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T= 31.75×ΔA÷W

(3) 按細菌或細胞密度計算:

單位定義:每 1 萬個細菌或細胞每分鐘生成 1 nmol 4-香豆酸輔酶A 定義為一個酶活力單位。

4CL(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×10 9]÷(500×V 樣÷V 樣總) ÷T= 0.063×ΔA

V 反總:反應體系總體積,2×10 -4 L;ε:4-香豆酸輔酶 A 摩爾消光系數,2.1×10 4 L / mol /cm;

d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.01 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;

T:反應時間,30 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500 萬。

b. 用 96 孔板測定的計算公式如下

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol 的 4-香豆酸輔酶A 定義為一個酶活力單位。

4CL(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×10 9]÷(V 樣×Cpr) ÷T= 63.49×ΔA÷Cpr

(2) 按樣本鮮重計算:

單位的定義:每 g 組織每分鐘生成 1 nmol 4-香豆酸輔酶A 定義為一個酶活力單位。

4CL(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×10 9]÷(W× V 樣÷V 樣總) ÷T= 63.49×ΔA÷W

(3) 按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每 1 萬個細菌或細胞每分鐘生成 1 nmol 4-香豆酸輔酶A 定義為一個酶活力單位。

4CL(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×10 9]÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T= 0.127×ΔA

V 反總:反應體系總體積,2×10 -4 L;ε:4-香豆酸輔酶 A 摩爾消光系數,2.1×10 4 L / mol /cm;

d:96 孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.01 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;

T:反應時間,30 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500 萬。


提供商

優利科(上海)生命科學有限公司

下載次數

4次

資料大小

22.5KB

資料類型

WORD 文檔

資料圖片

點擊查看

瀏覽次數

532次

產品展示

會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 欧美亚洲一区二区三区四区| 免费又色又爽又黄的小说软件| 巨乳玩具调教YIN荡H纯肉| 国产一区二区三区影院| 亚洲图片偷拍图自拍97| 欧美日韩大乳人妻中文字网站| jiizzyou欧美喷液| 日韩国产最新在线观看| 欧美日韩国产精品综合| 内射人妻无码色AV麻豆去百度搜| 一级毛片直接看| 日韩欧美国产黄色| 日韩一级一片内射欧美| 亚洲天堂男人在线观看| 麻豆文化传媒网站入口免费| 亚洲色图8p| 亚洲精品一区二区三区四区五区| 久久久国产精品久久| 久久久精品久久久久三级| 亚洲品质自拍网站| 亚洲深深色噜噜狠狠爱| 欧美国产日韩精品| 中文一区二区三区亚洲欧美| 他将头埋进双腿间吮小核故事| 国产精品久久久久久久白皙女| 99999久久久久久亚洲| 久久人妻福利中文字幕日韩| 色欲狠狠躁天天躁无码中文字幕| 亚洲国产精品无码AAA片| 3d性欧美动漫精品xxxx| 老师我好爽再深一点好舒| AV蜜臀在线网站| 亚洲欧洲日本无在线码天堂| 黄AV国产永久免费网站| 欧美日韩亚洲一区| 日韩黄色免费观看| freegaygvtvxxxx| 韩漫漫画免费观看| 久久久天堂国产精品女人| 亚洲欧美日韩一区在线| 亚洲精品毛A片久久久爽|