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如何看待固相萃取的常見故障和解決辦法
閱讀：811 發(fā)布時間：2022-11-8
固相萃取是一種樣品預處理技術，由液固萃取和柱液相色譜技術相結合發(fā)展而來，主要用于樣品的分離、純化和濃縮。與傳統(tǒng)的液液萃取法相比，可以提高分析物的回收率，更有效的將分析物與干擾組分分離，減少樣品預處理過程，操作簡單、省時、省力。
可是，用戶在使用固相萃取小柱過程中也會遇到各種各樣的問題。以下是總結使用過程中常見問題及解決辦法。
· 目標化合物回收率偏低(目標化合物沒有或部分被吸附在SPE柱上)
原因1：SPE柱沒有很好地被預處理
解決方法：反向柱：用甲醇，異丙醇或乙醇處理柱子，然后用稀釋樣品的溶劑處理柱子，注意不能讓SPE柱變干。
原因2：SPE柱的極性不合適
解決方法：選擇對目標化合物有明顯選擇性的SPE柱。
原因3：目標化合物對樣品溶液的親和力遠遠大于對SPE柱的親和力
解決方法：改變極性或樣品溶液的pH使目標化合物在樣品溶液中的親和力降低。
原因4：當大體積水樣品通過SPE柱時，反相柱填料失去柱子預處理留下的甲醇
解決方法：在樣品溶液中加入1%-2%的甲醇或異丙醇或乙腈。
· 洗脫餾分中含有干擾物
原因1：干擾物與目標化合物被同時洗脫
解決方法1：在洗脫目標化合物之前選用中等極性的溶劑將干擾物洗滌出SPE柱。可將兩種或更多種的溶劑混合以達到不同的極性。
解決方法2：選用對目標物化合物親和力更大而對干擾物親和力低的SPE柱。
原因2：干擾物來自SPE柱
解決方法1：用兩根不同極性的SPE柱以除去干擾物。如反相柱和離子交換柱或硅膠柱。
解決方法2：在柱子預處理之前用洗脫溶劑洗滌SPE柱。
· 目標化合物回收率偏低(目標化合物沒有被洗脫出SPE柱)
原因1：SPE柱的極性不合適
解決方法：選擇其他低極性或者選擇性弱的SPE柱。
原因2：洗脫溶劑不夠強，無法將目標物化合物從SPE柱上洗脫
解決方法：改變洗脫溶劑的pH以增加其對目標化合物的親和力。
原因3：洗脫溶劑體積太小
解決方法：增加溶劑體積。
原因4：目標化合物被不可逆地吸附在SPE載體上
解決方法：反相：選擇疏水性弱的載體。如果原來用的C18，則改為C8,C2,CN。
陽離子交換：用羧酸取代苯磺酸。
陰離子交換：用伯胺、仲胺代替叔胺。
· 萃取重現(xiàn)性差
原因1：在添加樣品之前SPE柱已干燥
解決方法：重新進行SPE預處理。
原因2：SPE柱超容量
解決方法：減少樣品量或選擇大容量柱。
原因3：樣品過柱流速太快
解決方法：降低流速。
原因4：洗脫液流速太快
解決方法：在使用外力之前讓洗脫液滲透過柱。兩次5ml洗脫可能比一次10ml，更有效。
原因5：目標化合物在樣品中的溶解度太大，樣品過柱時與樣品同時通過柱子而沒有被保留
解決方法：通過改變樣品極性或pH而改變目標化合物的溶解度。
原因6：SPE柱用極性溶劑處理而洗脫劑是不兼容的非極性溶劑
解決方法：在使用非極性溶劑之前對SPE柱進行干燥。
原因7：洗滌雜質用的溶劑太強，部分目標化合物與雜質同時被從SPE柱洗脫。目標化合物在這一步損失的多少取決于洗滌溶劑的流速，SPE的特性以及洗滌溶劑的體積。
解決方法：降低洗滌溶劑的強度。
原因8：洗脫液體積太小
解決方法：增加洗脫液的體積。
· 在用反相SPE柱萃取時，洗脫餾分中有水
原因：目標物化合物洗脫之前SPE柱沒有很好地干燥
解決方法：用氮氣或空氣干燥SPE柱：用20~100μL含60%-90%甲醇-水將SPE柱上的殘留水分除去。
· SPE柱流速降低或者阻塞
原因1：樣品存在過多的顆粒
解決方法：對樣品進行過濾或者離心。
原因2：樣品溶液粘度太大
解決方法：用溶劑對樣品進行稀釋。