牛乳是重要的營養物質，其中包含的蛋白質主要分為酪蛋白 (CN) 和乳清蛋白兩種，且酪蛋白占 80% [1]。牛乳中的酪蛋白主要包括 4 種亞型：αS1-CN、αS2-CN、β-CN 和 κ-CN，其中 β-CN 約占 CN 的 40%[2]。迄今為止已發現牛乳中含有 10 余種 β-CN 變異體，其中最主要的兩種是 A1β-CN（以下簡稱 A1 蛋白）和 A2β-CN（以下簡稱 A2 蛋白）[3]。A1 蛋白和 A2 蛋白的唯一區別在于其一級結構的第 67 位氨基酸不同：A1 蛋白的第 67 位氨基酸為組氨酸，而 A2 蛋白的第 67 位氨基酸為脯氨酸[4]。盡管這兩種酪蛋白的差別細微，但在人體內消化后會產生不同的生物活性肽[5]。研究表明，A1 蛋白產生的 β-酪啡肽-7 可誘發多種疾病，而 A2 蛋白則不產生 β-酪啡肽-7[6]。因此，開發一種分離并檢測 A1 蛋白和 A2蛋白的方法具有重要意義。