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全自動細胞計數(shù)儀在單細胞測序中的應(yīng)用如下
閱讀：313 發(fā)布時間：2023-1-28
全自動細胞計數(shù)儀是一種基于經(jīng)典臺盼藍染色法原理開發(fā)的細胞計數(shù)分析儀，集成了*的光學(xué)成像技術(shù)和智能圖像識別技術(shù)，可以快速準確地測量細胞濃度和細胞活力，為細胞計數(shù)人員提供方便，消除了繁瑣的過程，血細胞計數(shù)板引起的時間長、誤差大等問題。
目前，全自動細胞計數(shù)儀廣泛應(yīng)用于各種科學(xué)研究活動，包括癌癥、免疫學(xué)、傳染病、干細胞、臨床試驗以及農(nóng)作物和家禽疾病預(yù)防研究。同時，它還廣泛涉及醫(yī)療領(lǐng)域、生物制藥、細胞治療、工業(yè)生產(chǎn)和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。
全自動細胞計數(shù)儀的計數(shù)方法：
1、臺盼藍染色法：
臺盼藍染色是分別計數(shù)死亡細胞和活細胞的方法之一。染色的原理是臺盼藍無法穿透活細胞的完整細胞膜，因此活細胞不被染色；然而，死亡細胞的細胞膜被破壞，染料通過細胞膜在細胞中富集，使細胞變藍。然而，臺盼藍染色可能無法準確區(qū)分有核細胞和細胞碎片，因此它傾向于低估細胞總數(shù)并高估細胞生存能力。
2、熒光細胞計數(shù)法：
吖啶橙/碘化丙啶染色原理：活細胞通過AO染色發(fā)出綠色熒光，而死細胞通過PI染色發(fā)出紅色熒光。重要的是，對于具有復(fù)雜背景的細胞，例如外周血單核細胞，具有更多細胞片段或簇的細胞數(shù)量可以避免檢測到細胞片段。這種方法最近也被應(yīng)用于單細胞基因組學(xué)，其中綠色對應(yīng)于完整的細胞，紅色對應(yīng)于成功分離的細胞核。該策略允許研究人員計算未裂解的剩余細胞在細胞總數(shù)中的百分比，并計數(shù)細胞核以指示樣品質(zhì)量，幫助研究人員確定是否繼續(xù)單細胞基因組學(xué)過程。
全自動細胞計數(shù)儀在單細胞測序中的應(yīng)用如下：
單細胞基因組學(xué)技術(shù)目前正在全面應(yīng)用，如單細胞RNA測序和染色質(zhì)轉(zhuǎn)座酶可及性測序。與對大量細胞進行測序的傳統(tǒng)方法相比，單細胞基因組學(xué)技術(shù)突出了細胞之間的差異，這有助于更深入地了解樣本材料。例如，scRNA-seq可以比較健康和患病狀態(tài)的轉(zhuǎn)錄譜，而ATAC-seq可以解釋染色質(zhì)的可及性及其對基因表達的影響。
然而，這些研究都需要對分離的細胞核進行精確計數(shù)，因為文庫制備需要少量未裂解的細胞，并且樣品中沒有細胞團塊和碎片。此外，許多單細胞基因組學(xué)技術(shù)需要完整的細胞核才能正常工作。