Celetrix電轉(zhuǎn)幾乎不挑細胞種類，都可以達到高效率。有一部分細胞種類，由于其本身具有的性質(zhì)，在電轉(zhuǎn)時需要特別注意采用合適的方案。
單核細胞和巨噬細胞相關的細胞系，有些電轉(zhuǎn)質(zhì)粒后細胞會在兩三天內(nèi)幾乎全部死亡。THP-1，U937，HL-60和Molm13等細胞電轉(zhuǎn)質(zhì)粒后會死亡。其他老式的電轉(zhuǎn)儀電轉(zhuǎn)質(zhì)粒到這些細胞后會有部分細胞存活，是因為其中有很多沒有電轉(zhuǎn)成功的細胞活下來了，對于電轉(zhuǎn)沒有什么意義。
Celetrix專門開發(fā)了試劑盒可以幫助單核細胞類的細胞系進行質(zhì)粒電轉(zhuǎn)，目前驗證過THP-1和U937細胞轉(zhuǎn)入質(zhì)粒后部分細胞可以存活生長，從而使難做的細胞株穩(wěn)轉(zhuǎn)變得很簡單。下圖所示THP-1細胞電轉(zhuǎn)Cas9-gRNA-Puro-GFP質(zhì)粒時僅用1x10E6細胞就可以篩選得到穩(wěn)轉(zhuǎn)克隆并且成功進行基因編輯。
THP-1這些細胞電轉(zhuǎn)mRNA, siRNA和 Cas9 RNP沒有細胞死亡的問題。如果可以不使用質(zhì)粒，電轉(zhuǎn)非常容易，效率接近100%并且細胞存活非常好。
我們的THP-1試劑盒對于Molm13和SUP-M2細胞的質(zhì)粒電轉(zhuǎn)幫助不大，我們在繼續(xù)研究其質(zhì)粒電轉(zhuǎn)方法。
小鼠的原代骨髓分離的單核細胞和造血干細胞非常特殊，不僅電轉(zhuǎn)質(zhì)粒后容易死亡，也會迅速降解mRNA和siRNA造成電轉(zhuǎn)不成功的假象。只要電轉(zhuǎn)液和mRNA和這些細胞接觸1分鐘，再轉(zhuǎn)移到其他細胞上電轉(zhuǎn)就會發(fā)現(xiàn)mRNA已經(jīng)完全降解。小鼠脾臟細胞也有降解mRNA和siRNA的特性。而小鼠腹腔的巨噬細胞雖然電轉(zhuǎn)質(zhì)粒后容易死亡，電轉(zhuǎn)mRNA卻沒有降解問題可以使實驗順利進行。
電轉(zhuǎn)實驗中碰到特殊現(xiàn)象時，用戶可以發(fā)郵件向我們咨詢，我們可以提供其他實驗方案供選擇。
