成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

深圳市安培生物科技有限公司
中級會員 | 第5年

19126518388

血清系列
細胞轉染
支原體清除
細胞凍存
實驗耗材
分子試劑
細胞增殖與凋亡
Biozellen系列
培養基
ELISA試劑盒
TOYOBO(東洋紡)
ZYMO RESEARCH
Greiner(格瑞納)
IKA(艾卡)
化學發光底物(ECL)
PROSPEC系列
Epigentek系列
微生物檢測
細胞生物學
Corning康寧
解離試劑
細胞類-實驗耗材
原代細胞
植物檢測系列試劑盒
SERANA
BSA
細胞系
生化試劑盒
環境檢測系列試劑盒(AKEN)
類器官培養
緩沖器和解決方案
生物三凝膠基質
細胞因子分子
生物樣本庫
蛋白研究系列
修飾檢測試劑盒

Trizol法和柱式法RNA提取的實驗流程和注意事項

時間:2024/1/23閱讀:1660
分享:

實驗原理:

(一)Trizol 法

Trizol是一種酸性試劑,能從細胞和組織中快速分離RNA,其主要成分為異硫氰酸胍(GITC)和苯酚。裂解細胞后,GITC能使蛋白質和RNase變性,有利于保護RNA的完整性;加入氯仿離心后,樣品分為水相和有機相,RNA存在于上層水相中,而DNA和蛋白質則存在于中間層及下層有機相中,從而達到分離的目的。簡單來講就是裂解細胞使RNA得以釋放,加之有機溶劑使RNA與DNA、蛋白質分離,并進一步純化得到RNA的過程。


試劑、儀器與耗材:

Trizol試劑、氯仿、異丙醇、75%乙醇、RNase free Water、低溫冷凍離心機、勻漿器或組織研磨器、渦旋振蕩器、金屬浴、微量移液器、通風櫥、計時器、1.5ml EP管等。


提取步驟:

1.樣品處理:

細胞:貼壁細胞每106細胞加入1ml裂解液,吹打混勻。

懸浮細胞:植物、動物、酵母每10^6細胞加入1ml裂解液。

細菌細胞每107細胞加入1ml裂解液混勻。

組織:新鮮或-70℃凍存100mg組織加1ml裂解液,勻漿處理。


2.室溫放置5min,使核酸蛋白復合物全部分離;

3.向勻漿樣品中加入0.2ml的氯仿,蓋好管蓋,劇烈振蕩15s,室溫放置3-5min;

4.2-8℃,12000rpm離心10min。RNA主要存在于上層水相中把水相轉移至新的EP管中(注:不可吸到沉淀);

5.吸附柱前處理:在吸附柱中加入500ul洗柱液,室溫放置2min,2-8℃,12000rpm離心2min,棄廢液(小Tips:此步可以在第四步離心還剩2min左右的時候進行,這樣第四步離心結束就可以直接進行洗柱,而不需要再等時間);

6.在收集的上清中加入200ul無水乙醇混勻,加入吸附柱中靜置2min,2-8℃,12000rpm離心2min,棄廢液;

7.向吸附柱中加入600ul漂洗液(注:新買的試劑盒中漂洗液還需要加入一定量的無水乙醇,此步一定要確認漂洗液是否加入無水乙醇),2-8℃,12000rpm離心2min,棄廢液;

8.向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8℃,12000rpm離心2min,棄廢液(注:漂洗液在7-8步共加了兩次哦);

9.12000rpm離心2min,棄掉收集管,將吸附柱置于室溫數分鐘(10-15min)以去除殘留的漂洗液(注:最好在通風櫥進行,以免RNA酶對RNA的降解;通風櫥在使用前也可先紫外30min);

10.將吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O(通常取中間值),室溫放置5min,12000rpm室溫離心2min即可得到RNA溶液(注:所有步驟中僅最后一步離心是在室溫,其余均在2-8℃,因此,前幾步離心拿出樣品后一定要及時關上離心機蓋子,以免升溫,而在第9步離心結束后就可以打開離心機蓋子使其快速升至室溫)。

四、 注意事項

1.佩戴手套、口罩,消毒操作臺,杜絕外源酶的污染;

2.所用試劑耗材必須無酶化,有條件者可以直接購買,否則就要做好高壓滅菌的工作;

3.得到RNA溶液后可保存于-80℃,避免反復凍融,放置時間不可過長;

4.對于組織RNA的提取,一定要充分勻漿處理以使RNA充分釋放出來。

安培生物致力成為推動生命科學進步值得信賴的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術實力、先進的經營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業。總部設在廣東,服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發為一體的專業化高科技公司,旨在為生命科學的發展提供較好的產品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經科學等領域的產品供應線,在各個領域內向用戶提供較高的水平和質量穩定的產品,安培生物致力于為廣大的科研機構、高等院校等客戶提供各種產品、技術支持與服務。

可以在第一時間為用戶提供比較先進的專業資訊和完備的產品和物流服務。 專業的技術力量使得我們能夠為廣大用戶提供強大的技術支持,深厚的人脈資源使得我們在全國主要城市擁有眾多的合作伙伴,安培生物非常榮幸能將世界上先進的高科技產品推薦給國內從事生物學領域科研的老師和同仁。作為專業性的產品供應商,公司出資存備了大量現貨,配合優秀的銷售隊伍以及專業的技術支持,隨時為客戶提供服務。














會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 91九色视频无限观看免费| 婷婷精品国产亚洲AV在线观看| 超碰97人人做人人爱亚洲尤物| 精品国产美女AV久久久久| 久久久日韩精品一区二区| 丰满人妻无码AV一区二区免费| 亚洲欧美日韩国产视频| 黄乱色伦短篇小说h| 国产精品99久久久久久擦边| 韩漫漫画免费观看| 亚洲精品国产精品国自产小说| 人和拘一级毛片| 极品少妇伦理一区二区| 国产精品免费播放| 邻居把我弄的高潮三次面舞| 精品 在线 视频 亚洲| 午夜在线观看国产视频| 奇米影视7777久久精品人人爽| 午夜精品A片一区二区三区| 欧美日本韩国aaa| 熟女日韩中文字幕18禁| 纯肉高H放荡受BL文库| 久久久久久国产精品免费| 午夜宅宅伦电影网| 欧美日韩中字在线| 精品亚洲成人a| 亚洲女人天堂av| 蜜桃精品免费久久久久影院| 三级黄色免费片| 伊人春色在线观看| 国产白嫩护士在线播放| 果冻传媒一区二区天美传媒| 精品人妻少妇一区偷拍视频| 国产无遮挡A片又黄又爽网站| 国产无遮挡又黄又爽又色| 啊灬啊灬啊灬快好深用力| 波多野结衣中文字幕一区二区| 久久久日韩成人精品电影| 小柔的性放荡羞辱日记| 综合久久久久久久久久久| 女人洗澡沐浴露全身无遮挡|