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EB 病毒轉化成淋巴細胞

時間:2023/1/11閱讀:1280
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材料與儀器

全血
刀豆凝集素A
RPMI 生長培養基 離心管

步驟

1. 混合 10 ml 全血和 10 ml RPMI 生長培養基。

生長培養基(RPMI1640 800 ml,FBS 200 ml,2 mmol/L-谷氨酰胺,5 μg/ml 兩性霉素,50 μg/ml 慶大霉素)

2. 取 15 ml 無菌離心管,加 3 ml Histo-paque1077(Sigma),在其上加 4 ml 稀釋血,分離淋巴細胞。

3. 室溫 300 g 離心 30 分鐘,棄上層清亮血漿。

4. 收集不透明淋巴細胞層,細胞懸液倒入 50 ml 無菌離心管。

5. 20 ml RPMI 1640 生長培養基洗兩次,室溫 300 g 離心 10 分鐘。

6. 10 ml 血分離的細胞懸于 1.0 ml 含 EB 病毒的上清。

7. 細胞懸液(1.0 ml)放入 25 cm2 組織培養瓶,垂直放置,37℃ 5% CO2 孵育 1~3 小時。

8. 孵育后,加入 3 ml 含 0.2 μg/ml 刀豆凝集素A 的 RPMI 1640 生長培養基,水平放置,使細胞均勻分布于全生長面。

9. 每周加 1 ml 含刀豆凝集素A 的新鮮 RPMI 1640 生長培養基,不要吸出原培養基。


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安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規模生物生產、基因和細胞治療領域客戶,提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產,包括培養間充質干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養規模生產服務;提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質膠產品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品。安培生物專注為生物醫藥領域提供優質的產品和技術服務,努力發展為基因治療、細胞治療的生物科技企業。


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