成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

深圳市安培生物科技有限公司
中級會員 | 第5年

19126518388

血清系列
細胞轉染
支原體清除
細胞凍存
實驗耗材
分子試劑
細胞增殖與凋亡
Biozellen系列
培養基
ELISA試劑盒
TOYOBO(東洋紡)
ZYMO RESEARCH
Greiner(格瑞納)
IKA(艾卡)
化學發光底物(ECL)
PROSPEC系列
Epigentek系列
微生物檢測
細胞生物學
Corning康寧
解離試劑
細胞類-實驗耗材
原代細胞
植物檢測系列試劑盒
SERANA
BSA
細胞系
生化試劑盒
環境檢測系列試劑盒(AKEN)
類器官培養
緩沖器和解決方案
生物三凝膠基質
細胞因子分子
生物樣本庫
蛋白研究系列
修飾檢測試劑盒

備擇方案 1 對貼壁細胞

時間:2022/3/10閱讀:1259
分享:

原理

材料與儀器

貼壁細胞 [35S]標記L-甲硫氨酸(>800 Ci/mmol)/[35S]標記蛋白質水解產物
PBS(冷凍) 37℃ 脈沖標記培養基
100 mm 組織培養皿 配有液體同位素垃圾閥門的真空吸氣器

步驟

1. 在 100 mm 組織培養皿中培養細胞到 80%~90% 融合(0.5 × 107~2 × 107 細胞,取決于細胞類型)。


2. 如上所述制備 [35S] 甲硫氨酸的工作液體(見基本方案步驟 1)。


3. 吸棄上清并用 10 ml 預熱(37℃)脈沖標記培養基輕柔洗細胞 2 次,棄掉洗液。


4. 加 5 ml 預熱脈沖標記培養基,在潮濕、37℃、5% CO2 培養箱內孵育 15 min,以除去細胞內的甲硫氨酸。


5. 棄掉細胞上的培養基,加入 2 ml [35S] 甲硫氨酸的工作液體(見步驟 2),在 CO2 培養箱內孵育 10~30 min。


6. 棄掉細胞上的培養基。用 10 ml 冷凍的 PBS 洗細胞并棄掉 PBS。加 10 ml 冷凍的 PBS,并用塑料刮子或橡膠細胞刮小心刮取收集細胞。


7. 轉移懸液到 15 ml 離心管中,4℃,300 g 離心 5 min,棄上清。如果在標記過程中細胞明顯脫落,有必要將含有 [35S] 甲硫氨酸的工作液中的細胞小心刮取,并將懸液轉移到 15 ml 離心管中,在用 PBS 洗滌前離心。


8. 可選:通過 TCA 沉淀法測定標記摻入的量(見輔助方案)。

注意事項

如果在標記過程中細胞明顯脫落,有必要將含有[35S]甲硫氨酸的工作液中的細胞小心刮取, 并將懸液轉移到15 ml離心管中,在用PBS洗滌前離心。

常見問題

1. 實驗材料中貼壁細胞,如 HeLa、NRK、Ml、COS - 1、CV - 1,或原代培養的成纖維細胞或內皮細胞。

2. 如果細胞沉淀不馬上使用的話,見基本方案步驟7。

同實驗其他方法

氨基酸代謝標記實驗

1. 室溫融化 [35S] 標記甲硫氨酸,并用預熱的(37℃)脈沖標記培養基制備 0.1~0.2 mCi/ml 的工作溶液。2. 室溫下 300 g 離心 5 min,獲得懸液中 0.5 × 107~

備擇方案 2 示蹤標記細胞

1. 每個時間點和每個樣品準備 0.5 × 107 ~2 × 107 細胞, 每 0 .5 × 107 ~2 × 107 細胞用 2 ml 0.1~0.2 mCi/ml [35S] 甲硫氨酸脈沖標記

備擇方案 3 長期細胞標記

1. 在預熱的 37℃ 長期標記培養基中制備 0.02~0.1 mCi/ml [35S] 甲硫氨酸工作溶液(見基本方案步驟 1)。2.1 對于懸浮細胞:用預熱的長期標記培養基準備并洗細胞一次

以上就是本期的內容,更多資訊,歡迎點擊安培生物網站鏈接了解更多技術與產品資訊

 

安培生物科技有限公司介紹:

安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規模生物生產、基因和細胞治療領域客戶,提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產,包括培養間充質干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養規模生產服務;提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質膠產品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品。安培生物專注為生物醫藥領域提供優質的產品和技術服務,努力發展為基因治療、細胞治療的生物科技企業。


會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 国产精品人妻一区夜夜爱| 欧美精品在线综合| 性生活久久久久久久| 亚洲国产综合av| 成人午夜黄色在线| 丰满人妻被中出中文字幕| 午夜福利国产精品| 一女六男NP慎入H| 欧美一级久久久久久久久大| 欧美日韩国产精品综合| 农村老熟妇乱子伦视频| 快穿之浪荡H啪肉NP文肉BL| 99久久国产露脸精品竹菊传媒| 中国一级特黄剌激爽毛片| 国产99九九久久无码熟妇| 韩国漫画漫免费观看免费| 日韩高清在线中文字幕| 理论片第1页在线看| 亚洲精品做爰无码片麻豆| 亚洲情久久久久久| 麻豆免费版| 中文字幕精品久久久久人妻| 欧美日韩免费一区二区三区| 国产毛A片久久久久久无码| 中文有码中文字幕免费视频| 亚洲人成在线观看网站无码| 亚洲国产艾杏在线观看| 99亚洲狠狠色综合久久位| 色播久久| 国产日韩欧美高清免费视频| 欧美日韩人妻中文另类| 亚洲第一综合天堂另类专| 男男被一根又一根H强迫NP| 久久中文骚妇内射| 韩国成人理论电影| 亚洲.欧美.中文字幕在线观看| 国产午夜免费视频片夜色| 欧美精品二区在线播放| A级毛片无码久久精品免费| 亚洲乱码精品久久久久..| 亚洲精品AV无码永久无码|