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人生長激素的放射免疫分析法

時間:2021/12/16閱讀:1345
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材料與儀器

hGH表達質粒
洗滌液 親和素包被珠
試管 γ計數儀

步驟


1.  取轉染了hGH表達質粒的哺乳動物細胞的培養液100~500 μl。

2.  加100 μl 培養液或標準品至12 mm×75 mm 圓底試管中。加入100 μl 125I-標記的抗體溶液,混合。加入1顆親和素包被珠,蓋上試管蓋或用Parafilm膜封口,室溫下在一水平旋轉器上以約170 r/min 搖動下溫育90 min。

3.  加2 ml 冼滌液洗磁珠兩次。*吸干洗滌液。
 
圖一、人生長激素表達載體
圖一、人生長激素表達載體
 
4.  將試管置于γ計數儀上計數1 min。
 
5.  用試劑盒中的hGH標準品測得的數據繪制標準曲線。用這個標準曲線來計算未知樣品的hGH含量。


同實驗其他方法

CAT活性的層析分析法

1.  100 mm 培養皿中的轉染了CAT表達質粒的貼壁細胞,用PBS洗兩次,每次5 ml每培養皿加入1 ml TEN溶液。將細胞置于冰浴5 min。   2.  用橡膠

原位裂解細胞的CAT分析法

1.  60 mm 培養皿中轉染了CAT表達質粒的細胞,用2 ml PBS洗1次。每培養皿加入2 ml 低滲緩沖液,在室溫下溫育2~5 min。 2.  吸去低滲緩沖液,加入400 μl T

CAT活性的相-抽提分析法

一、來源于哺乳動物細胞 1.  按“CAT活性的層析分析法"中的步驟1~5的凍融法,制備哺乳動物細胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制細胞方法來收集細胞,則將原位裂解法的步驟1至4用以下的步驟2

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安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規模生物生產、基因和細胞治療領域客戶,提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產,包括培養間充質干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養規模生產服務;提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質膠產品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品。安培生物專注為生物醫藥領域提供優質的產品和技術服務,努力發展為基因治療、細胞治療的生物科技企業。


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