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MLE-12 小鼠肺上皮細胞
MLE-12【MLE12】 | |
l 細胞鑒定 | 種屬鑒定已通過 |
l 細胞來源 | 國家資源庫 |
l 細胞特性
| 1） 來源：小鼠正常肺組織 2） 形態：上皮細胞樣，貼壁生長 3） 含量：>1x106 細胞數 4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途：僅供科研使用。 |
l 培養條件： | 1） 準備DMEM/F12基礎培養基 (awcell-0005) 94% 優質胎牛血清 （awcell-0500） 2% GlutaMAX-1谷氨酰胺 ( awcell-0900 ) 1% HEPES 1M Buffer solution (awcell-01200) 1% P/S青霉素-鏈霉素 （awcell-15140-122） 1% ITS（胰島素+轉鐵蛋白+硒） (awcell-4507) 1% hydrocortisone （awcell-8450） 10nM 雌二醇 (awcell-8140） 10nM 2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。 |
l 注意事項：
| 該細胞為輕微貼壁細胞，傳代可以參考以下方法： 1. 收集：將培養瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。 3. 將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。 3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。 |
l 運輸形式： | 低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。 常溫（2） T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 |
l 生物安全 | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |
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