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人骨髓間充質干細胞提取方法

閱讀:2489      發布時間:2023-8-15
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  作為常見的干細胞類型,人骨髓間充質干細胞廣泛應用于科學研究和臨床治療。細胞具有分化潛能,可以分化為各種類型的細胞,如成骨細胞、成軟骨細胞和脂肪細胞等。它們在細胞替代治療、組織工程和再生醫學領域具有巨大的應用前景。下面將為您詳細介紹干細胞的提取方法。
  

人骨髓間充質干細胞

 

  首先,我們需要對提取的細胞進行嚴格的質量控制。這包括細胞活性檢測、純度檢測和細胞計數。細胞活性檢測通常使用MTT實驗,將細胞與MTT試劑混合,觀察細胞的生長情況。純度檢測可以通過細胞計數和血球計數板計數來實現。細胞計數時,將細胞懸液加入血球計數板,使用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)進行檢測。細胞計數的低標準為每毫升細胞數量大于100,000個。細胞計數后,還需對細胞濃度進行檢測。
  
  接下來,我們將介紹人骨髓間充質干細胞的提取方法。為了最大限度地保留細胞的活性,我們需要采用溫和的方法進行提取。常用的提取方法包括小鼠骨髓提取法和人骨髓提取法。
  
  1、小鼠骨髓提取法
  
  首先,從小鼠的尾部提取約5毫升血液。然后,將血液離心,獲得紅細胞和血漿。血漿中含有間充質干細胞。接下來,通過免疫學實驗篩選出間充質干細胞。最后,通過透射電子顯微鏡觀察細胞形態,確保細胞結構完整。
  
  2、人骨髓提取法
  
  從成年供體獲取新鮮的人骨髓,并將其冷凍保存。在實驗室內,使用無菌手術刀或刮刀從供體骨髓中刮取骨髓組織。隨后,將骨髓組織放入緩沖液中,進行漂洗和分離。離心后,收集上清液,并加入細胞分離液。使用懸浮細胞離心機進行細胞分離,將骨髓中的間充質干細胞提取出來。最后,使用流式細胞儀對提取出的細胞進行檢測和鑒定。
  
  

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