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PriCells: 臺盼藍染色法
PriCells: 臺盼藍染色法
材料:
1. 顯微鏡、玻片、蓋玻片、滴管;
2. 試劑:0.4%臺盼藍染液;
3. 臺盼藍(Trypan blue):0.4g;
4. 生理鹽水:100ml;
操作步驟:
1. 用Hanks液配制0.1%臺盼藍溶液;
2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液來消化培養的貼壁細胞;
3. 再加入適量Hanks液制成細胞懸液;
4. 將待染色細胞稀釋至所需濃度(方法及濃度范圍與細胞計數相同);
5. 每0.1ml細胞懸液約加新鮮配制的染液一小滴,室溫下染3—5min;
6. 染色過的細胞材料,取一滴細胞懸液置玻片上,加蓋玻片后放高倍鏡下觀察;
7. 死亡的細胞著淺藍色并膨大,無光澤。活細胞不著色并保持正常形態,有光澤;
8. 計數1000個細胞中的活細胞和死細胞數目;
9. 統計未染色細胞。可按公式計算出細胞活率。
細胞活率(%)=未染色的細胞數/觀察的細胞總數×100
注意事項:
1. 染色時間不能太長,否則活細胞也會逐漸積累染料而染成顏色,使監測結
果偏低;
2. 另可結合細胞計數方法,同時進行細胞計數和活力檢測;