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PriCells: 正常滑膜細(xì)胞原代培養(yǎng)
PriCells: 正常滑膜細(xì)胞原代培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)材料：
1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：大鼠、兔，人手術(shù)切除的關(guān)節(jié)等；
2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素，pH7.2；
3. 培養(yǎng)液：RPMI1640培養(yǎng)基，補(bǔ)加15%小牛血清；
實(shí)驗(yàn)方法：
1. 將大鼠處死后，用75%酒精消毒；
2. 用手術(shù)剪剖開(kāi)其四肢皮膚與肌肉，暴露長(zhǎng)骨兩端的關(guān)節(jié)，取出關(guān)節(jié)面滑膜組織置于盛有緩沖液的培養(yǎng)皿中；
3. 剔除滑膜組織外層結(jié)構(gòu)及周邊軟骨組織，用緩沖液洗2—3次；
4. 將滑膜組織置于盛有少量小牛血清的培養(yǎng)皿中，剪碎成1mm×1mm×1mm大小的植塊；
5. 將制備的植塊接種到螺旋口培養(yǎng)瓶中。反轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使植有組織塊的一面朝上，加入培養(yǎng)液，蓋好瓶蓋。將培養(yǎng)瓶放入含5%CO2的培養(yǎng)箱中在37℃條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
6. 培養(yǎng)4h后，組織塊較牢黏附于瓶底時(shí)，再輕輕反轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，繼續(xù)培養(yǎng)；
7. 培養(yǎng)3d后換培養(yǎng)液；
PriCells提供：
1. 各種原代細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基；
2. 各種原代細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑；
3. 原代細(xì)胞分離試劑盒；
4. 原代細(xì)胞鑒定試劑盒；
5. 原代細(xì)胞總蛋白質(zhì)抽提物；
6. 原代細(xì)胞總RNA；
7. 原代細(xì)胞總DNA；