PriCells: 牛或豬大血管原代內(nèi)皮細(xì)胞的分離-消化刮脫法
實(shí)驗(yàn)材料：
1.    牛或豬
2.    PBS，含青霉素100U/ml和鏈霉素100μg/ml
3.    0.1%Ⅰ型膠原酶
4.    眼科剪，眼科鑷
5.    慕絲線
6.    離心管（15ml、50ml）

實(shí)驗(yàn)方法：
1.    分離牛或豬的主動(dòng)脈等大血管，長(zhǎng)15-20cm，用絲線結(jié)扎血管各分支后，取出主動(dòng)脈。放入盛有含青霉素100U/ml和鏈霉素100μg/ml的PBS平皿中，縱向切開血管壁，內(nèi)皮朝上，用PBS沖洗3次。
2.    在另一平皿中加入少量0.1%Ⅰ型膠原酶溶液。37℃下消化5-10min，然后加入培養(yǎng)液終止消化。
3.    刮取內(nèi)皮細(xì)胞。用刮刀輕輕刮內(nèi)膜表面，刮刀與血管表面成60°，刮刀要輕而均勻地推進(jìn)。不可刮得過深，也不要刮到血管的邊緣處，以免成纖維細(xì)胞被污染。
4.    將刮下的內(nèi)皮細(xì)胞懸液浮于培養(yǎng)液中，1000r/min，離心10min。吸去上清；再加入15ml培養(yǎng)液，用滴灌輕輕吹打，以便分散細(xì)胞團(tuán)，再離心1次，并吸去上清。加入5ml培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞，制備細(xì)胞懸液。
5.    PriCells-原代內(nèi)皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基
6.    PriCells-原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑
7.    PriCells-原代細(xì)胞分離試劑盒