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SNP-M144-小鼠血管外膜成纖維細胞
  • SNP-M144-小鼠血管外膜成纖維細胞
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貨物所在地:湖北武漢市

地: 武漢東湖高新區高新大道光谷生物

更新時間:2025-02-14 21:00:07

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尚恩生物依托國際化的*技術及多年專業化的原代細胞分離培養經驗,能夠為您提供高品質的原代細胞、原代細胞提取物定制服務。集結豐富經驗的人才,并配備了整套實驗設備,全程自主研發,嚴控開發流程,保障產品質量,緊抓售后服務,可以提供高質量的小鼠血管外膜成纖維細胞。已與國內外多家科研單位、藥企、以及醫院等建立了良好的合作關系,成為生物醫藥行業的誠信伙伴和堅強后盾。

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---尚恩生物 ---

一、細胞基本屬性

貨號:SNP-M144

產品名稱:小鼠血管外膜成纖維細胞

物種:小鼠

組織來源:血管組織

細胞簡介:該細胞分離自血管外膜組織;血管外膜是由疏松結締組織組成,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結締組織細胞以成纖維細胞為主,當血管受損傷時,成纖維細胞具有修復外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一,其主要生理功能合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

方法簡介:采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系:成纖維體系

發貨形式:T25瓶(1×106左右)

規格:5×10^5cells/T25瓶

培養條件:具體培養條件詳詢尚恩生物細胞培養技術專員

培養環境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠血管外膜成纖維細胞專用*培養基(產品貨號:SNPM-M144)作為體外培養的培養基。


二、細胞培養操作

換液周期2-3天
培養基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動培養瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養瓶放入37度培養箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養基終止胰酶消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養瓶里;
8.補足*培養基,將培養瓶放回培養箱靜置培養;
注意事項不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態。


三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,第二天轉入液氮保存

注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案


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