就一個實驗室而言無論運作的多么好，總會因為革新技術(shù)或拓展方向二影響原來的流程，從而產(chǎn)生各種各樣的問題。有些地方錯誤的操作有可能帶來嚴(yán)重的后果，那么今天主要列舉細(xì)胞生長緩慢的兩大原因。
01
培養(yǎng)體系出現(xiàn)問題
01
檢查你所培養(yǎng)的細(xì)胞是否存在污染。
（1）如果培養(yǎng)細(xì)胞未添加抗生素，細(xì)胞污染則是不可避免的。
① 用肉眼和顯微鏡進行檢查。
② 如果細(xì)胞被污染則要棄掉。
（2）由于支原體污染不容易覺察到，因此必須定期檢測。
（3）檢測可能污染的途徑和原因。
02
檢查你用于培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基和血清（例如：是否批次不同或廠商不同）。如果你常規(guī)使用的是粉劑或10×儲存液，而現(xiàn)在購買的培養(yǎng)基更換為1×液體，而隨后證明問題就出自于此。
03
如果問題與培養(yǎng)基無關(guān)，那么很可能還是細(xì)胞的問題。
（1）復(fù)蘇另一支凍存的細(xì)胞，并且與正在培養(yǎng)的細(xì)胞加以比較。兩種細(xì)胞的培養(yǎng)應(yīng)分開，以免在培養(yǎng)之初就產(chǎn)生污染。隨后按（2）～（4）步的方法做排查。
（2）對傳代培養(yǎng)的細(xì)胞進行計數(shù)，并繪制生長曲線，與以前培養(yǎng)該細(xì)胞的資料進行比較，檢查是否有下列改變:
① 傳代時是否接種密度過低。
② 細(xì)胞傳代是否過于頻繁。
③ 傳代前細(xì)胞平臺期是否過長。
（3）是否更換了胰蛋白酶或其他分離劑的批號，檢查批號和供貨商。
（4）是否細(xì)胞分離過程中嚴(yán)重?fù)p傷了細(xì)胞，應(yīng)檢測:
① 胰蛋白酶（其他消化試劑）消化時間是否過長。
② 消化液的濃度和活性是否過高、過強。
③ 胰蛋白酶消化時，孵箱溫度是否過高。
④ 吹打消化細(xì)胞時是否過于用力。
⑤ 細(xì)胞是否對 EDTA過于敏感（如果添加了EDTA）。
⑥ 胰蛋白酶稀釋是否有誤。
⑦ 是否使用了一批劣質(zhì)的胰蛋白酶消化液。
02
檢查共用的設(shè)備和試劑
溫度設(shè)定不準(zhǔn)
01
a 自動調(diào)溫器損壞。
b 開關(guān)孵箱門過于頻繁。
c 孵箱門未關(guān)緊。
d 風(fēng)扇損壞造成散熱不均。
孵箱濕度不能維持
02
a 水盤中未加水。
b 孵箱有滲漏。
c 開關(guān)孵箱門過于頻繁。
d 在Petri培養(yǎng)皿中放置一定量的PBS，每日稱重，以檢查蒸發(fā)率。
孵箱的CO2濃度不準(zhǔn)
03
a 開關(guān)孵箱門過于頻繁。
b CO2控制器出現(xiàn)問題。
公 司 簡 介
武漢尚恩生物技術(shù)有限公司坐落于武漢東湖區(qū)光谷生物城，專注于細(xì)胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務(wù)，公司建有標(biāo)準(zhǔn)化GMP實驗室、動物房，已整體通過ISO 9001:2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證，獲得企業(yè)、3551人才、瞪羚企業(yè)、科技小巨人等多項榮譽。
公司主要研發(fā)生產(chǎn)細(xì)胞系、原代細(xì)胞、胎牛血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、*培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品，提供細(xì)胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購；細(xì)胞庫凍存細(xì)胞系500余種，同時通過不間斷引種細(xì)胞擴大豐富細(xì)胞種類；公司還提供人源細(xì)胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等。
公司細(xì)胞業(yè)務(wù)覆蓋國內(nèi)各大高校生物實驗室、生物研究機構(gòu)及一些生物科研、診斷、制藥公司，不斷為廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)！尚恩生物—您專業(yè)的細(xì)胞供應(yīng)商！
END
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