人乳腺癌細(xì)胞MCF-7保留了多個(gè)分化了的乳腺上皮的特性，包括：能通過胞質(zhì)雌激素受體加工雌二醇并能形成圓形復(fù)合物。MCF7 [MCF-7]細(xì)胞含有Tx-4癌基因；腫瘤壞死因子c可以抑制MCF7 [MCF-7]細(xì)胞的生長，抗雌激素處理MCF7[MCF-7]細(xì)胞能調(diào)變IGFBP'S的分泌。
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
恢復(fù)凍存的細(xì)胞的活性。
2.實(shí)驗(yàn)原理
在實(shí)際操作中，凍存細(xì)胞要進(jìn)行復(fù)蘇,再培養(yǎng)傳代。復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi)，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞。
3.實(shí)驗(yàn)材料
①儀器：CO2培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、超凈臺(tái)、離心機(jī)、37℃水浴鍋。
②材料：于液氮中保存的人乳腺癌細(xì)胞MCF-7細(xì)胞凍存管、培養(yǎng)瓶、離心管、移液管，巴斯德吸管、廢液缸、75%酒精棉球、酒精燈、記號(hào)筆、鑷子、滅菌細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
③試劑：RPMI1640*培養(yǎng)基。
4.操作步驟
(1)實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
①將水浴鍋預(yù)熱至37℃，將培養(yǎng)液預(yù)熱后分裝到培養(yǎng)皿中。
②離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等。
(2)取出凍存管
①根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。
②從液氮罐中取出細(xì)胞盒，取出所需的細(xì)胞，同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
(3)迅速解凍
①迅速將凍存管投入已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷地?fù)u動(dòng)，使管中的液體迅速融化。
②1~2 min后凍存管內(nèi)液體*溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
(4)制備細(xì)胞懸液
①將復(fù)蘇細(xì)胞直接轉(zhuǎn)入已添加培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶內(nèi)，置于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)（培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊）。
②第2天（在細(xì)胞貼壁生長24 h前），用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
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