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應(yīng)用發(fā)光細(xì)菌檢測(cè)水質(zhì)毒性與環(huán)境毒性
應(yīng)用發(fā)光細(xì)菌檢測(cè)水質(zhì)毒性與環(huán)境毒性、
簡(jiǎn)介：
發(fā)光細(xì)菌是一類在正常的生理?xiàng)l件下能夠發(fā)射可見光的細(xì)菌。發(fā)光細(xì)菌在正常的生理?xiàng)l件下能發(fā)出波長(zhǎng)在450～490nm 的藍(lán)綠色可見光，在一定的試驗(yàn)條件下發(fā)光強(qiáng)度是恒定的。與外來受試物接觸后，由于毒物具有抑制發(fā)光的作用，發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度即有所改變，變化的程度與受試物的濃度在一定范圍內(nèi)呈相關(guān)關(guān)系，同時(shí)與該物質(zhì)的毒性大小有關(guān)。
利用發(fā)光細(xì)菌來檢測(cè)有毒物質(zhì)，由于有毒物質(zhì)僅干擾發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光系統(tǒng)，發(fā)光強(qiáng)度的變化可以用發(fā)光光度計(jì)測(cè)出，費(fèi)時(shí)較少且靈敏度高，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，所以利用發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度作為指標(biāo)來監(jiān)測(cè)有毒物質(zhì)，在國(guó)內(nèi)外越來越受到重視，在環(huán)境監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用也越來越廣泛。我國(guó)于1995年將這一方法列為環(huán)境毒性檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)方法(GB／T15441—1995)。
目前國(guó)內(nèi)常用的3種發(fā)光細(xì)菌為：明亮發(fā)光桿菌、費(fèi)氏弧菌、青海弧菌。其中明亮發(fā)光桿菌在“GB/T15441-1995 水質(zhì) 急性毒性的測(cè)定 發(fā)光細(xì)菌法”中所使用；費(fèi)氏弧菌在歐盟的標(biāo)準(zhǔn)中所使用；青海弧菌是在青海湖的魚體內(nèi)提取的菌種，屬淡水菌，在測(cè)試飲用水時(shí)有較大優(yōu)勢(shì)。
檢測(cè)方法：
以明亮發(fā)光桿菌T3小變種檢測(cè)為例：
1. 試劑與材料準(zhǔn)備
發(fā)光細(xì)菌凍干粉復(fù)蘇：使用3%的氯化鈉復(fù)蘇發(fā)光細(xì)菌凍干粉，然后稀釋到1萬細(xì)胞/ml，形成工作液
參比毒物：制作不同濃度的作為參比毒物0.02 - 0.24mg/L
樣品：采集或準(zhǔn)備相應(yīng)的待測(cè)樣品，使用蒸餾水稀釋，然后加入氯化鈉（終濃度3%）
2. 儀器
單管或微孔板發(fā)光檢測(cè)儀
3. 樣品檢測(cè)
取一定量的發(fā)光細(xì)菌工作液，放入發(fā)光檢測(cè)儀中檢測(cè)發(fā)光值；加入待測(cè)樣品，混勻，孵育15分鐘；孵育完成后，檢測(cè)殘留發(fā)光值。