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CAS檢測培養基原理和使用方法
閱讀：61 發布時間：2025-5-30一、氫氧化細菌和鐵載體的簡介：
氫氧化細菌（Hydrogen-oxidizing bacteria）是一類能通過氧化氫氣獲得能量，固定二氧化碳作為唯yi碳源的微生物，土壤中分布廣泛，尤其是豆科植物根際大量存在。氫氧化細菌沒有單獨的分類，多分布在假單胞菌屬、副球菌屬、黃桿菌屬、分支桿菌屬、產堿菌屬、諾卡氏菌屬、醋酸桿菌屬及棒桿菌屬等。絕大部分氫氧化細菌是兼性化能自養型，它們可以自養生長、異養生長、甚至混合營養生長，好氧或兼性厭氧。氫氧化細菌屬于植物根際促生菌，在農作物增產方面有巨大的應用潛力，所以其各種促生機制的研究已成為熱點，其中分泌鐵載體就是幾種重要的促生機制之一。
鐵載體（siderophore）是一類能特異性結合鐵離子并供給微生物細胞的低分子量物質。鐵元素是微生物生長的必需元素，在缺鐵的環境中微生物會分泌鐵載體螯合鐵離子滿足自身生長需要。目前，常用的鐵載體檢測方法為Schwyn和Neilands發明的通用CAS瓊脂平板法，當細菌產生的鐵載體與由鉻天青S（CAS）、十六烷基三甲基溴化銨（HDTMA）、鐵離子組成的藍色復合物結合后，會奪走鐵離子，使細菌周圍的培養基顏色由藍色變為橘黃色，出現鐵載體分泌圈，有利于判斷細菌是否產生鐵載體。
二、CAS檢測培養基
1. 產品用途：用于細菌鐵載體篩選試驗。
2. 配方（mg/L）：
鉻天青S（CAS） | 60.5 |
十六烷基三甲基溴化銨（HDTMA） | 72.9 |
六水氯化鐵 | 2.645 |
二水磷酸二氫鈉 | 295.25 |
十二水磷酸氫二鈉 | 1213.5 |
氯化銨 | 125 |
磷酸二氫鉀 | 37.5 |
氯化鈉 | 62.5 |
瓊脂 | 9000 |
pH值6.8±0.1（25℃） | |
三、試驗方法：
1. 稱取本品10.87g，加熱煮沸完-全溶解于1000mL蒸餾水中，分裝三角瓶，116℃高壓滅菌30分鐘，冷卻至50℃時，傾入無菌平皿，備用；
2. 用接種環挑取質控菌株新鮮培養物點種到平板上；
3. 放置35℃需氧培養24小時，記錄試驗結果。
四、試驗結果判斷：
接種以下質控菌株，放置于35℃需氧培養24小時。
質控菌株 | 菌株編號 | 接種量（CFU） | 參比或計數培養基 | 質控結果 |
銅綠假單胞菌 | ATCC 9027 | / | / | 菌落周圍有黃色環 |
圖1 銅綠假單胞菌ATCC 9027在CAS檢測培養基菌落特征
注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。