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北京中檢維康生物技術有限公司

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當前位置:> 供求商機> CE2012,96T-iElisa 克倫特羅抗生素類檢測試劑盒

[供應]CE2012,96T-iElisa 克倫特羅抗生素類檢測試劑盒

貨物所在地:北京北京市

產地:中國

更新時間:2025-02-14 21:00:07

有效期:2025年2月14日 -- 2025年8月14日

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iElisa 克倫特羅抗生素類檢測試劑盒
本試劑盒是利用競爭ELISA方法,在酶標板微孔上預包被抗克倫特羅抗原。檢測時,加入標準品或樣品溶液,克倫特羅抗體及酶標記物,包被抗原和加入樣本中的克倫特羅競爭性地與克倫特羅抗體結合后,再與酶標記物形成抗原抗體復合物,用TMB底物顯色;

 iElisa 克倫特羅抗生素類檢測試劑盒

iElisa 克倫特羅抗生素類檢測試劑盒

 

iElisa克倫特羅檢測試劑盒

(C/N: CE2012-G) 

---北京中檢維康生物技術有限公司

 

1、檢測原理

本試劑盒是利用競爭ELISA方法,在酶標板微孔上預包被抗克倫特羅抗原。檢測時,加入標準品或樣品溶液,克倫特羅抗體及酶標記物,包被抗原和加入樣本中的克倫特羅競爭性地與克倫特羅抗體結合后,再與酶標記物形成抗原抗體復合物,用TMB底物顯色;加入反應終止液,在450nm波長酶標儀下進行檢測,樣品中的克倫特羅濃度與吸收光強度成反比。

2、檢測范圍

本試劑盒是應用ELISA技術研發的藥物殘留檢測產品,與儀器分析技術比較,能經濟、快速地檢測出尿樣、肌肉、肝臟及飼料等中的克倫特羅。

與類似物的交叉反應率:

克倫特羅&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;*

特布他林&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;7%

沙丁胺醇&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;25%

鹽酸腎上腺素&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.1%

去甲腎上腺素&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.1%

萊克多巴胺&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.1%

多巴酚丁胺&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.1%

3、試劑盒組成

  1. 酶標板1塊,96/
  2. 標準液6瓶(1mL/瓶):

0 ppb0.2ppb0.6ppb1.8ppb5.4ppb16.2ppb

  1. 抗體工作液 &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;9mL
  2. 酶標記物 &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;3mL
  3. 底物液A &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;7mL
  4. 底物液B &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;7mL
  5. 終止液   &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;7mL
  6. 說明書 &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;1

4、需要但試劑盒中不提供的器材和試劑

1)設備

  1. 微孔板酶標儀(450nm)
  2. 振蕩器
  3. 離心機
  4. 微量移液器:20μL200μL,100μL~1000μL
  5. 容量瓶:100mL500mL1000mL

2)試劑

  1. 氫氧化鈉、濃鹽酸、乙酸乙酯、乙腈

5溶液的配制

樣本前處理需配制

  1. 配液10.1M鹽酸溶液

量取0.86mL濃鹽酸加去離子水混勻定容至100mL

  1. 配液21M鹽酸溶液

量取8.6mL濃鹽酸加去離子水混勻定容至100mL

  1. 配液30.1M氫氧化鈉溶液(組織樣本)

0.4gNaOH加去離子水混勻溶解,定容至100mL

  1. 配液41M氫氧化鈉溶液(飼料樣本)

4.0gNaOH加去離子水混勻溶解,定容至100mL

  1. 配液5:乙腈-0.1M鹽酸(組織樣本)

乙腈與0.1M鹽酸溶液按體積比84:16混勻

6樣本前處理方法

樣本處理前須知

處理任何樣本時,都須注意:

  1. 實驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時要更換吸頭。
  2. 實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈,必須使用潔凈實驗器具,以避免污染干擾實驗結果。

樣本處理步驟

尿樣

  1. 尿樣(若渾濁可以4000/ 離心5分鐘,取清亮部分),20μL進行分析。
  2. 不用時應冷凍保存。

稀釋倍數為1

畜禽組織(雞、鴨、豬肌肉/肝臟等)

  1. 稱取2±0.05 g勻漿的樣品于50mL離心管中,加入6mL乙腈-0.1M鹽酸,振蕩5分鐘;室溫4000/分以上離心10分鐘;
  2. 取上清3mL,加2mL 0.1M氫氧化鈉溶液,6mL乙酸乙酯,振蕩5分鐘;室溫4000/分,以上離心10分鐘;
  3. 取全部上清至干凈玻璃試管中,于56℃水浴下氮氣/空氣吹干;
  4. 1mL去離子水復溶,振蕩30秒。
  5. 20μL進行分析。

稀釋倍數為1

飼料

  1. 用食品粉碎機或乳缽研碎飼料樣品,稱5±0.05 g研碎的飼料樣品,加10mL乙腈;用振蕩器劇烈震蕩5分鐘,室溫3000/分離心5分鐘;
  2. 3mL上層清亮有機相至10mL干凈的玻璃試管中,于50-60℃氮氣流下吹干。
  3. 加入1mL正己烷,用渦旋儀渦旋30秒;再加入1mL去離子歲混合,用渦旋儀渦旋1分鐘,3000/分離心5分鐘;去除上層正己烷相。
  4. 取下層20μL進行分析。

稀釋倍數為1

7酶聯免疫檢測步驟

測定前須知:

  1. 使用之前將所有試劑和需用微孔板回升至室溫。
  2. 使用之后立即將所有試劑放回2-8℃
  3. 在使用中不要讓微孔干燥。
  4. ELISA分析中的重復性,很大程度上取決于洗板的一致性,正確的洗板操作是ELISA測定程序中的要點。
  5. 在所有恒溫孵育過程中,避免光線照射,用該板膜蓋住微孔板。

測定步驟:

  1. 將所需試劑從冷藏環境中取出,在室溫下平衡30分鐘,每種液體使用前均須搖勻。注意標準液均需做2個平行試驗。
  2. 加標準液或樣品液20μL到相應的微孔中,然后加20μL酶標記物,80μL抗體工作液,用膜蓋好,25℃下避光反應30分鐘。
  3. 洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,加去離子水 250mL/孔,每次浸泡15~30秒,充分洗滌4~5次,用吸水紙拍干。
  4. 顯色:每孔先各加入底物液A 50μL,再各加入底物液B 50μL,輕輕晃蕩混勻,并在25℃下避光反應15分鐘。
  5. 讀數:每孔各加50μL終止液,在酶標儀于450nm處測定OD值(建議用450/630nm雙波長檢測,在5分鐘內讀完數據)。

8結果分析    

所測得的標準液或樣品吸光度的平均值(B)除以di一個標準液(0標準液)的吸光度(B<蘇b>0)值再乘以*,得到百分吸光度值。

百分吸光度值(%)=B/B<蘇b>0 ×*

        以標準品濃度的10為底的對數為X軸, 百分吸光值為Y軸,繪制標準曲線。將樣本的百分吸光值代入標準曲線,從標準曲線上讀出樣本所對應的值,作為10的冪,乘以稀釋倍數,即為樣品中所含克倫特羅的量。利用試劑盒專業分析軟件進行計算,更便于大量樣品的準確、快速分析。/

9試劑盒靈敏度、準確度、精密度

試劑盒靈敏度0.1ppb

樣本低檢測限:

尿樣&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.2ppb

組織&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.4ppb

飼料 &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;0.4ppb

回收率:

尿樣  &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;90±10%

組織&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;85±10%

飼料  &河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;&河llip;80±15%

精密度

 試劑盒的變異系數均小于10%

10、注意事項

  1. 室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20-25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
  2. 在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
  3. 反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。如不慎滴漏到皮膚上,請盡快用水沖洗。
  4. 不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
  5. 保存試劑盒于2-8℃,不要冷凍,將不用的微孔板放進自封袋重新密封。標準物質和無色的發色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
  6. 顯色試劑有任何顏色表明發色劑變質,應當棄之。0標準的吸光度(450nm)值小于0.5A450nm<0.5 )時,表示試劑可能變質。
  7. 在加入底物液后,一般顯色15分鐘即可。若顏色較淺,可延長反應時間到20分鐘(或更長),但不得超過30分鐘。反之,則減短反應時間。
  8. 該試劑盒佳反應溫度為25℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。

11、貯藏條件及保存期

貯藏條件:在28℃保存試劑盒

保存期:本試劑盒有效期為12個月。

 

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