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原位雜交儀的應用有哪些?

閱讀:2660      發布時間:2022-10-14
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一、原位雜交儀應用
①細胞特異性mRNA轉錄的定位,可用于基因圖譜,基因表達和基因組進化的研究;
②感染組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位,如EB病毒mRNA、人類乳頭狀瘤病毒和巨細胞病毒DNA的檢測;
③癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉錄水平的表達及其變化的檢測;
④基因在染色體上的定位;
⑤檢測染色體的變化,如染色體數量異常和染色體易位等;
⑥分裂間期細胞遺傳學的研究,如遺傳病的產前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定,某些腫瘤的診斷和生物學劑量測定等。
二、注意事項
1、固定液的選擇及固定時間  石蠟組織建議用10%中性緩沖福爾馬林固定6~48h,其它固定液對實驗結果可能產生一定的影響。  組織離體后應盡快固定,建議在標本離體后30min內固定。如樣本固定不及時,熒光信號會減弱。  固定液的體積是組織體積的4~20倍,否則固定不充分,容易出現無信號或者信號很弱的現象。  而且,為了保證信號的準確性,蠟塊最好在2年內進行檢測,已經切好的切片在6周內檢測最佳。
2、組織切片和載玻片的選擇  組織切片4~5μm 厚,過厚或過薄的切片均會對信號的強弱產生影響,而且切片應完整,質量良好,否則會在預處理時掉片。  載玻片的選擇建議使用防脫載玻片,有條件的實驗室可使用更好的陽離子或者陰離子專用載玻片,可有效防止脫片現象的發生。  

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