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快速掌握顯微注射儀的使用秘籍！
閱讀：2118 發(fā)布時(shí)間：2021-5-19
顯微注射儀采用顯微操作系統(tǒng)(倒置顯微鏡/體視顯微鏡+顯微操作器)將供體物(基因、細(xì)胞核或細(xì)胞其他成分)直接注入宿主細(xì)胞(去核卵母細(xì)胞、胚胎細(xì)胞或體外培養(yǎng)的細(xì)胞)中，研究供體物的功能或者獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物的技術(shù)。
顯微注射儀的操作過程：
一、針頭裝液：
1、使用無菌的微量加樣器從微注射針頭的后部加入0.5～1μl的注射樣品。
2、使用玻璃毛細(xì)管拉出毛細(xì)管針頭，里面有與毛細(xì)管平行的細(xì)絲，有利于液體從后部向針頭方向運(yùn)動(dòng)。只需在針頭后部浸入1mm深度，不需使用手指或其他東西接觸，就足以使少量的樣品到達(dá)針尖部。
二、針頭定位：
1、將裝液后的針頭的游離端安在連接器上，然后旋緊連接器以固定針頭，再將其固定到微操作儀的托針管上。
2、把載有待注射細(xì)胞的蓋玻片轉(zhuǎn)移到里面有緩沖培養(yǎng)基的平皿中，將其放在中央。
3、將培養(yǎng)皿放在顯微鏡載物臺(tái)上，盡量將蓋玻片上所畫圓圈的一個(gè)對(duì)準(zhǔn)光照的中心區(qū)，這時(shí)光的亮度較好。
4、用低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)細(xì)胞調(diào)焦。
5、將針頭推入視野中心，在視野中針頭呈陰影狀。
6、輕輕的落下針頭，直至到達(dá)培養(yǎng)基中后停下。
7、通過顯微鏡觀察，移動(dòng)針頭，必要時(shí)調(diào)整微操作儀，直到針頭的陰影在視野的上方。然后確定針頭的位置，使其約處在視野中心。
8、輕輕下調(diào)針頭，直到針頭變得清晰一些
9、調(diào)到工作放大倍數(shù)，調(diào)準(zhǔn)細(xì)胞焦距，找到針尖。
10、如果找不到，重新使用低倍鏡，盡量將針頭調(diào)到視野的中心，重復(fù)上述的步驟。
11、小心下調(diào)針尖，直到其*聚焦。