HPLC系統(tǒng)能否有效運行取決于流動相和樣品不受化學雜質(zhì)或固體懸浮液的影響。對于HPLC流動相的處理和使用注意事項討論主要圍繞在流動相的制備和使用中應采取的措施。對于樣品過濾的重要性討論主要圍繞在進樣時清潔樣品的好處。
HPLC色譜柱是HPLC系統(tǒng)中的重要組成部分，使用時需要細心使用，用完后要維護避免下次使用發(fā)生問題。經(jīng)常更換色譜柱是很昂貴的，因此為了節(jié)約成本，需要較大程度地延長色譜柱的使用壽命。同時也要細心維護色譜柱，以便每次獲得結(jié)果保持準確性和一致性。
由于經(jīng)常使用色譜柱，化學雜質(zhì)和固體懸浮液顆粒等會逐漸積累，色譜性能在使用過程中開始下降。流動相或樣品中存在的大顆粒雜質(zhì)開始沉積在色譜柱的入口上，從而干擾流動的均勻性。較小的顆粒會導致背壓增加，導致阻塞固定相中的流路。
污染物有哪些？
1、反相分離中高度保留的化合物，例如脂肪酸。
2、不可逆地保留的化合物，如殘留的蛋白物質(zhì)，在樣品提取時并未*去除。解決這個問題可以在HPLC分析之前對樣品中的蛋白質(zhì)進行去蛋白化。
3、顆粒雜質(zhì)，可能是樣品未過濾，系統(tǒng)組件（例如泵或進樣器中的密封件）的磨損導致產(chǎn)生顆粒雜質(zhì)。又或者是進樣時溶劑中本身還有顆粒物雜質(zhì)，沒有過濾導致顆粒物質(zhì)進入系統(tǒng)。建議使用溶劑進樣口過濾器，過濾掉微小顆粒物質(zhì)，避免進入到HPLC系統(tǒng)中。
恒譜生2μ,5μ,10μ,20μm液相色譜儀流動相入口溶劑過濾器，保護泵、單向止回閥 、進樣器 、色譜柱免受有害顆粒污染物的損壞；吸濾阻力較小，較大的圓柱形篩板表面積，幾乎沒有背壓；吸濾頭尺寸較小，可用于多種小瓶口的存儲池容器；不會將空氣引入系統(tǒng)，無氣泡進入流動相管路，儲液瓶溶劑抽取利用率可達99%以上，大大減少瓶底溶劑因無法凈真空吸取而造成的浪費；設(shè)有多階管路接頭，兼容多種內(nèi)徑溶劑流動相管路，不需要更換吸濾頭即可匹配不同規(guī)格的吸管；產(chǎn)品兼 容性高，適用于各種品牌的HPLC系統(tǒng)。
4、柱內(nèi)殘留緩沖液，干燥后導致結(jié)晶沉淀。使用色譜柱后用HPLC級純水或緩沖溶液洗滌色譜柱可防止此類鹽沉淀的形成。
什么是保護柱？
保護柱是安裝在進樣器和分析柱之間的，截留導致色譜柱篩板堵塞、柱頭塌陷和柱效下降的化學物質(zhì)和顆粒物?；瘜W物質(zhì)和顆粒物會污染、堵塞色譜柱，給分析帶來不良影響等。這時通過在色譜柱前安裝分析保護柱可以防止其產(chǎn)生，能起保護色譜柱的作用。保護柱最好與分析柱具有相同的填料，以消除分離的復雜性。保護柱的內(nèi)部ID應與分析柱相當 ，以最小化背壓。保護柱需要定期更換，可根據(jù)例如背壓增加，峰展寬和峰保留時間的變化來決定更換的周期。
恒譜生建議您可以有效地利用、定期更換色譜保護柱，以延長色譜柱的壽命。
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