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技術文章

透射電鏡實驗科研實驗技術服務介紹

閱讀:130          發布時間:2024-10-12

透射電鏡實驗


  一、概述:

  透射電鏡(TEM)利用電子束作光源,用電磁場作透鏡,經加速和聚集的電子束投射到非常薄的樣品上,形成明暗不同的影像,是綜合物理學和生物學相關領域重要的分析方法。透射電子顯微鏡相比光學顯微鏡具有較高分辨率,可達0.2nm,200-200k倍之間連續可調,用于觀察樣品的內部超微精細結構。

  

二、實驗應用

  TEM在細胞生物學、病毒學、病理學、材料科學等諸多領域具有廣泛應用。可以用于觀測動物植物細胞超微結構,如線粒體、內質網、高爾基體、溶酶體、葉綠體、液泡及細胞內生細菌等結構變化。觀測病毒顆粒、外泌體、病原微生物、各類細菌真菌、納米材料及納米顆粒、晶體結構。

  

三、實驗示例

華研生物

華研生物

四、送樣運輸要求:

  ①、組織樣本:

  1.組織固定,體積盡可能小,一般要求1mm3大小,如果容易漂浮的組織樣本,在管口用棉花塞住保證組織浸泡于2.5%戊二醛中,組織太大固定不充分,容易造成照片模糊或者結構溶解。

  2.組織取材要迅速干脆,在幾分鐘內保存于戊二醛,保持結構完整性。

  3.組織在戊二醛中4℃保存1個月以內進行實驗,不要存放太長時間。

  4.部分組織需要在電鏡時定位,需要加收定位費,常規組織定位如:腎臟觀察腎小球變化,肺組織觀察特殊的細胞結構,腦組織定位CA1、CA2、CA3結構等。

  ②、細胞樣本:

  樣本在收集后一定要肉眼可見方可進行實驗,一般要求細胞量10^6以上。

  貼壁細胞:

  棄去培養基,PBS洗滌3次,每孔加入1ml 2.5%戊二醛固定1-1.5h,固定完畢后,細胞刮輕柔的將細胞刮下,收集至1.5mL離心管內,取5ul在顯微鏡下觀察細胞是否刮碎,如果細胞完整,則1000rpm離心5min收集細胞,加入1ml新鮮的2.5%戊二醛重懸置于4度避光保存,一般保存1周進行實驗。

  懸浮細胞:細胞離心收集后,加1ml 2.5%戊二醛混勻固定,4度避光保存。

  ③、微泡&外泌體:

  客戶需要將微泡&外泌體分離出來,2.5%戊二醛重懸固定,2.5%戊二醛的量不要太多100uL-200uL即可,保證微泡&外泌體的濃度便于觀察尋找。


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