小核酸藥物是目前發展最為迅猛的基因療法之一，將帶來“除小分子藥和抗體藥"之外的第三次制藥浪潮。小核酸藥物包括反義寡核苷酸（ASO）、小干擾RNA（siRNA）、微小RNA（miRNA）、信使RNA（mRNA）、適配體（aptamer）等。其中，ASO藥物是小核酸藥物領域發現最早、獲批最多的藥物類別，也是該領域研發的重要方向之一。
一、ASO藥物作用機制
反義寡核苷酸（antisense oligonucleotides，ASO）指與靶基因mRNA互補的一段單鏈DNA或RNA序列，長度通常為15-25nt，通過堿基配對原則與其互補的RNA結合，可以調節靶RNA的功能。ASO的作用機制主要分為兩大類：一類是基于RNase H1-介導的mRNA降解機制(圖1A所示）；另一大類是基于ASO結合帶來的空間位阻，封閉mRNA關鍵區域，從而影響mRNA的成熟或者翻譯為蛋白質（圖1B所示）。
圖1 ASO作用機制（圖片來源：Nature Reviews Drug Discovery, 2020, 19(10): 673-694）
二、ASO藥物體外代謝研究策略
和傳統小分子藥物一樣，在藥物臨床前研究階段，通常需要對ASO藥物進行體外代謝研究，并提供代謝途徑及其產物相關信息。ASO藥物的代謝酶主要為核酸外切酶和核酸內切酶，廣泛分布于血液和各個組織器官，一個合適的體外代謝研究體系，能夠最·大程度地預測體內的情況，對于ASO藥物的早期篩選非常重要。表1所示為常用的ASO藥物體外代謝研究體系。
表1 ASO藥物的體外代謝研究體系
生物基質 | 試驗類型 | 備注 |
血清/血漿 | 代謝穩定性，血漿蛋白結合試驗 | 金屬螯合劑抗凝的血漿不適合代謝穩定性研究；ASO藥物血漿蛋白結合試驗可選擇超濾法和超速離心法。 |
肝S9 | 代謝穩定性，代謝產物鑒定 | 肝S9一定程度上可以代替肝組織勻漿使用。 |
肝微粒體 | 代謝穩定性 | 肝微粒體的核酸酶活性較低，但也有文獻報道人肝微粒體也能代謝ASO化合物。 |
肝組織勻漿 | 代謝穩定性，代謝產物鑒定 | 酶體系比較全面，推薦用于ASO藥物的體外篩選評價。 |
肝細胞 | 代謝產物鑒定，細胞攝取試驗 | 肝細胞酶體系最為完善，適用于肝靶向的ASO藥物研究。 |
溶酶體 | 代謝穩定性 | 溶酶體具有豐富的酶體系，包括核酸酶和各種水解酶等，是研究ASO藥物代謝穩定性的高效實驗體系。 |
腦組織勻漿、腦脊液 | 代謝穩定性，腦組織勻漿和腦脊液蛋白結合試驗 | 對于神經系統及神經肌肉適應癥類的ASO藥物，可選擇腦組織勻漿和腦脊液進行體外相關研究。 |
需要指出的是，在藥物研發前期只用1-2個體外代謝體系去正確預測體內穩定性或代謝情況是非常困難的。因此建議在早期ASO藥物篩選時進行多體系代謝研究相互驗證，不斷優化試驗方案，進而選擇與體內相關性最佳的體外代謝體系進行篩選研究。
三、IPHASE相關產品
為滿足客戶對于ASO藥物體外代謝研究的需求，IPHASE作為體外研究生物試劑引·領者，憑借先進的設備，專業的技術人員和多年研發的經驗，開發出來多種用于ASO藥物體外代謝研究的產品，助力廣大客戶進行ASO藥物早期篩選研究。
類別 | 分類 |
亞細胞組分 | 肝溶酶體 |
酸化肝勻漿液 | |
肝/腸/腎/肺S9 | |
肝/腸/腎/肺微粒體 | |
肝/腸/腎/肺胞質液 | |
原代肝細胞 | 懸浮肝細胞 |
貼壁肝細胞 | |
專屬血漿 | 血漿穩定性 |
血漿蛋白結合 | |
空白生物基質 | 空白腦組織 |
空白腦脊液 |
IPHASE/匯智和源憑借多年的研發經驗，推出了多領域、多種類的高·端科研試劑，為藥物早期研發提供篩選工具，為生命科學領域的探索提供新材料、新方法和新手段，為食品、藥品、化學品等的遺傳毒性研究提供便捷產品，望廣大科研工作者咨詢。
發 文 章 得 獎 勵
凡使用本公司產品，在國內及國際刊物上發表論文（論文發表日起一年內），并注明產品屬于IPHASE BIOSCIENCES Co.,Ltd. / 匯智和源生物技術（蘇州）有限公司所有，即可申請獎勵。根據發表刊物影響因子不同，給予不同金額獎品：
非SCI論文及IF≤5分，500元禮品；
5分＜IF≤8分 800元；
8分＜IF≤10分 1000元；
IF≥10分 2000元；
注：禮品卡也可兌換同等金額產品購買抵用券；
活動多多，禮品豐厚，快來參與吧！
關 于 我 們
匯智和源，致力于為創新藥研發企業及生命科學研究機構提供高品質的生物試劑，IPHASE為公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research"。
7
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務