詳細介紹
▎ 斑馬魚黑色素(ML)定量檢測試劑盒ELISA用途
該試劑盒采用競爭法檢測血清、血漿、細胞培養上清液中ML的濃度。
▎ 檢測原理
本試劑盒采用競爭法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。在預包被抗斑馬魚黑色素(ML)抗體(固相抗體)的微孔酶標板中,加入斑馬魚黑色素(ML)校準品和待測樣本,再加入HRP標記的斑馬魚黑色素(ML)抗原(酶標抗原),經過溫育與充分洗滌,去除未結合的組分,在微孔板固相表面形成固相抗體-酶標抗原的免疫復合物。加底物A和B,底物在HRP催化下,產生藍色產物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉化為黃色,在酶標儀450nm波長上測定吸光度(OD值),吸光度(OD值)與待測樣品中斑馬魚黑色素(ML)的濃度負相關。擬合校準品曲線,可以計算出樣本中斑馬魚黑色素(ML)的濃度。
反應類型 | 競爭法 |
規格 | 96T/48T |
中文名稱 | 斑馬魚黑色素(ML)定量檢測試劑盒ELISA |
反應時間 | 1.5 h |
檢測方法 | 酶聯免疫吸附測定 |
檢測范圍 | 0.25 ng/ml - 8 ng/ml |
靈敏度 | 0.1 ng/ml |
上樣體積 | 50 μL/孔 |
樣本類型 | 血清、血漿、組織、細胞上清或其他生物樣本 |
▎ 特異性
可檢測樣本中的 ML, 且與其它類似物無明顯交叉反應。
▎ 重復性
板內,板間變異系數均<10%。
▎ 標曲圖
▎ 批內差
取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續測定20次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
▎ 批間差
選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值
▎ 精密度
精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV(%)=SD/mean×100 CV<10% Inter-批間差: CV<13%
▎ 穩定性
經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
▎ 試劑盒的組成
▲未開封試劑盒,4℃保存;已開封,標準品-20℃保存,酶標板加干燥劑后密封-20℃保存,其他4℃保存。
英文名稱 | 中文名稱 | 規格 | 規格 |
Microe isa stripplate | 包被微孔板 | 96T | 48T |
Standard | 標準品 | 0.3ml/管*6 | 0.3ml/管*6 |
HRP-Corjugate | HRP標記抗體 | 10mL | 5mL |
Sample Diluent | 稀釋液 | 6mL | 3mL |
Chromogen SolutionA | 底物液A | 6mL | 3mL |
Chromogen SolutionB | 底物液B | 6mL | 3mL |
Stop Solution | 終止液 | 6mL | 3mL |
20× Wash Solution | 20×濃縮洗滌液 | 25mL | 15mL |
Product Description | 說明書 | 1份 | 1份 |
Sealing film | 封板膜 | 2張 | 2張 |
▎ 實驗所需自備物品
1、450±10nm濾光片酶標儀(建議儀器使用前預熱)
2、高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3、Eppendorf 移液器.
4、蒸餾水或去離子水.
5、脫脂棉吸水紙.
6、37℃恒溫箱.
7、100ml和1000ml量筒.