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novocib：Human PNP  貨號：#E-Nov2

NOVOCIB'S PNP 是一種在大腸桿菌中表達(dá)的純且有活性的人嘌呤核苷磷酸化酶。它的表觀分子量為 32.12 kDa。

PNP 是一種重要的治療性靶酶。已經(jīng)開發(fā)了幾種 PNP 抑制劑來治療癌癥、病毒感染和自身免疫性疾病。PNP 也是新型抗寄生蟲藥物的藥物靶點(diǎn)。

單位定義：在 pH 值為 8、25μC 時(shí)，一個(gè)單位每分鐘催化 1.0 μmole 肌苷的裂解。
純度：由 SDS-PAGE 控制。

檢測條件： NOVOCIB 開發(fā)了一種偶聯(lián)黃嘌呤脫氫酶 （XDH） 系統(tǒng)，可直接監(jiān)測 PNP 對肌苷 （IR） 的磷酸解反應(yīng)。

PNP，一種多面酶

催化活性

嘌呤核苷磷酸化酶 （PNP） 參與嘌呤代謝的補(bǔ)救途徑。在無機(jī)磷酸鹽作為第二底物存在下，PNP 催化核糖核糖苷或脫氧核糖核糖核苷的糖苷鍵斷裂，生成嘌呤堿基和核糖或脫氧核糖-1-磷酸。該反應(yīng)對于天然底物是可逆的：

PNP 抑制劑的治療潛力

PNP 缺陷導(dǎo)致 T 淋巴細(xì)胞減少癥，通常對 B 淋巴細(xì)胞功能沒有明顯影響。這些癥狀表明 PNP 的有效抑制劑作為選擇性免疫抑制劑可能用于治療 T 細(xì)胞白血病或 T 細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病，例如紅斑狼瘡和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎1 （1,2）。血漿和尿液尿酸鹽水平的降低是 PNP 缺乏癥的另一個(gè)癥狀。PNP 抑制劑可能有助于治療高尿酸血癥狀態(tài)，例如繼發(fā)性痛風(fēng)或黃嘌呤痛風(fēng)。
一些 PNP 抑制劑已開展臨床試驗(yàn)，用于治療皮膚 T 細(xì)胞淋巴瘤、急性淋巴細(xì)胞白血病 （ALL）、HIV 感染和銀屑病。

Peldesine （BCX-34） 被授予治療 T 細(xì)胞淋巴瘤的孤兒藥地位，并作為炎癥性自身免疫性疾病的免疫調(diào)節(jié)劑進(jìn)入 III 期。它最近進(jìn)入了 HIV 感染的臨床試驗(yàn) （3）。

Forodesine （BCX-1777） 在美國具有孤兒藥地位，用于治療 T 細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤，包括皮膚 T 細(xì)胞淋巴瘤 （CTCL）、慢性淋巴細(xì)胞白血病 （CLL） 和相關(guān)白血病，包括 T 細(xì)胞幼淋巴細(xì)胞白血病 （PLL）、成人 T 細(xì)胞白血病和毛細(xì)胞白血病，以及用于治療急性淋巴細(xì)胞白血病 （ALL）。Forodesine 還于 2006 年 12 月在歐洲被設(shè)計(jì)為用于治療 ALL 的孤兒藥，并于 2007 年 2 月被設(shè)計(jì)為用于治療 CTCL （4）。

還研究了 PNP 抑制劑以防止切割，以及 PNP 導(dǎo)致的核苷類似物失活。

注意：原生動(dòng)物寄生蟲對嘌呤具有營養(yǎng)缺陷型，并且有自己的 PNP，這些 PNP 具有與人類 PNP 不同的特定活性和特性。原生動(dòng)物寄生蟲 PNP 被認(rèn)為是合理的感染靶標(biāo)（例如惡性瘧原蟲）（5）。

PNP，對核苷類似物
治療效果的威脅 在體內(nèi)，磷酸解比嘌呤核苷合成更受青睞，并且與兩個(gè)額外的酶促反應(yīng)偶聯(lián)：黃嘌呤氧化酶 （XO） 氧化釋放的嘌呤堿基，以及次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶 （HGPRT） 磷酸核糖化 （6）。因此，PNP 在嘌呤代謝的挽救途徑中起關(guān)鍵作用，使細(xì)胞能夠利用從代謝的嘌呤核糖苷和脫氧核糖核苷中回收的嘌呤堿基合成嘌呤核苷酸。 PNP 對嘌呤核苷的這種磷酸解反應(yīng)對核苷類似物的治療效果有直接影響。抗腫瘤或抗病毒核苷類似物在被細(xì)胞核苷激酶磷酸化并轉(zhuǎn)化為活性核苷酸形式之前可能被 PNP 裂解。例如，2'，3'-二脫氧鳥苷 （ddG）（7）、9-β-D-阿拉伯呋喃鳥苷 （AraG）（8） 以及其前藥之一奈拉拉濱 （Arranon®， GSK）（9），其通過腺苷脫氨酶 （ADA） 在細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)化為 AraG，是 PNP 耐藥核苷類似物，而 2'，3'-二脫氧肌苷 （ddI）（10） 在體內(nèi)很容易被 PNP 裂解。
由于無環(huán)核苷類似物雖然被病毒胸苷激酶 （TK） 磷酸化，但對 PNP 切割特別耐，因此它們通常被認(rèn)為是抗病*藥物的好候選者（例如阿昔洛韋、更昔洛韋）（11）。

請注意，更昔洛韋不僅對 PNP 耐藥，而且還是一種 PNP 抑制劑。

PNP，一種用于核苷類似物
酶促合成的工具 PNP 催化的可逆反應(yīng)可以有利地用于合成核苷類似物，特別是當(dāng)化學(xué)合成難以制備和/或產(chǎn)率低時(shí)。

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