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HiFiScript gDNA Removal cDNA Synthesis Kit
  • HiFiScript gDNA Removal cDNA Synthesis Kit
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具體成交價以合同協議為準
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更新時間:2024-06-11 14:52:29瀏覽次數:603評價

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供貨周期 一個月 應用領域 醫療衛生,環保,化工,生物產業,綜合
HiFiScript gDNA Removal cDNA Synthesis Kit:本產品是用于去除基因組DNA進行反轉錄的試劑盒。該試劑盒在 42℃, 2 分鐘即可除去基因組 DNA。

HiFiScript gDNA Removal cDNA Synthesis Kit



本產品是用于去除基因組DNA進行反轉錄的試劑盒。該試劑盒在 42℃, 2 分鐘即可除去基因組 DNA。同時由于反轉錄試劑中含有抑制 gDNA Eraser 的組分,經過 gDNA Eraser 處理后的樣品可以直接進行逆轉錄反應合成 cDNA。本試劑盒配有新型高效反轉錄酶 HiFiScript,新穎突變位點大幅提 升酶的轉錄活性,cDNA ***鏈合成的效率和產量更高,可利用pg級的總 RNA 或 mRNA 合成 cDNA ***鏈。如逆轉錄產物 cDNA 用于下游熒光定 量檢測,可在 42℃,15 分鐘完成逆轉錄反應。本試劑盒適用于***鏈 cDNA 的合成和后續的 RT-PCR、RT-qPCR、以及全長 cDNA 文庫的構建等。

產品特點1.快速去除基因組:含有去除基因組 DNA 的 gDNA Eraser,只需 2 分鐘即可除去基因組 DNA。2.快速逆轉錄:15 分鐘即可獲得熒光定量 PCR 模板 cDNA 第一鏈合成。3.靈敏度高:可利用 pg 級總 RNA 或 mRNA 模板合成 cDNA 第一鏈。4.高效的逆轉錄效率:新穎突變位點大幅提升酶活性能,獲得更高產量的cDNA。注意事項1.在操作過程中應避免 Rnase 污染,防止 RNA 降解或實驗中的交叉污染,建議操作人員帶口罩和一次性手套并經常更換手套,使用專門的儀器和耗材。2.逆轉錄體系配制在冰上進行操作,防止 RNA 發生降解。試劑盒的酶使用后盡快置于-20℃保存,并盡量避免反復凍融。3.反應體系可倍比放大,10ul 反應體系可最大使用 1ug 總 RNA。4.Primer Mix 由 Oligo(dT)和 Random primer 配制而成,也可根據實驗需要選用 Oligo-dT Primer 或 Gene Specific Primer。5.若起始 RNA 的量小于 50 ng,建議加入 RNA 酶抑制劑。本試劑盒并未提供,如需要可單獨向本公司訂購。6.對于二級結構復雜的 RNA 模板,建議在操作步驟之前,將模板 RNA 在65℃孵育 5 分鐘立刻置于冰上,短暫離心后進行下一步操作。使用方法將模板 RNA 在冰上解凍;試劑盒組分在室溫解凍后立刻置于冰上。使用前將每種溶液渦旋振蕩混勻,并經短暫離心后使用。

去除基因組 DNA 反應1)根據以下表格在冰上配制反應體系,總體積為 10ul。為了保證反應液配制的準確性,先按反應數+2 的量配制預混體系,然后再分裝到每個反應管中,最后加入 RNA 樣品。

HiFiScript gDNA Removal cDNA Synthesis Kit

注意:如果總RNA量大于1ug,請按比例擴大反應體系。若起始RNA的量小于50 ng,則建議加入RNA酶抑制劑。2)渦旋震蕩混勻,短暫離心,使管壁上的溶液收集到管底。3)42℃孵育2分鐘(室溫反應時,可以延長到30分鐘)。4)反應結束后,短暫離心,置于冰上冷卻。2. 逆轉錄反應1)根據以下表格在冰上配制反應體系,反應液配制請在冰上進行。為了保證反應液配置的準確性,先按數+2 的量配制成預混溶液,然后再分裝 10ul到每個反應管中,取配制的預混液 10ul 加入至已完成去基因組的步驟 1 反應管中。

HiFiScript gDNA Removal cDNA Synthesis Kit

注意:Primer Mix 可根據實驗需要使用 Oligo-dT Primer 或 Gene SpecificPrimer,建議 20ul 反應體系 Oligo-dT Primer 50pmol,或 Gene Specific Primer2 pmol。2)混勻,短暫離心,使管壁上的溶液收集到管底。3)cDNA 合成反應條件:a. 若下游進行熒光定量 PCR 檢測,42℃孵育 15 分鐘,85℃孵育 5 分鐘。b. 若下游進行普通 PCR 檢測,42℃孵育 30-50 分鐘,85℃孵育 5 分鐘。注意:對于二級結構復雜或GC含量高的模板,可以提高逆轉錄溫度至50℃,增強逆轉錄效率。4)反應結束后,短暫離心后置于冰上,再進行后續 PCR 或熒光定量 PCR,如果需要長時間保存,請置于-20℃。注意:進行 Real-time PCR 反應時,逆轉錄產物的加量應不超過 PCR 反應總體積的 1/10。



本產品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途


上海牧榮生物科技有限公司

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