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目錄:上海牧榮生物科技有限公司>>實(shí)驗(yàn)試劑>>試劑盒>> 維生素B6測(cè)試盒

維生素B6測(cè)試盒
  • 維生素B6測(cè)試盒
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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維生素B6測(cè)試盒 維生素B6(Vitamin B6,VB6)試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品.為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。

維生素B6測(cè)試盒

微量法100T/96S

注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義

維生素B6(Vitamin B6)又稱吡哆素,其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺,在體內(nèi)以磷酸酯的形式存在,是一種水溶性維生素在細(xì)胞中參與多種蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝,對(duì)生物體具有極其重要的作用。

測(cè)定原理

VB6與4-氨基安替比林在強(qiáng)氧化劑作用下生成穩(wěn)定的黃色化合物,在390nm有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液:液體70mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體1mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體5mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:液體8mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:液體8mL×1瓶,4℃避光保存。

樣本處理

  1. 組織:將樣品磨碎,按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入0.6mL提取液)加入提取液,60℃浸提30min,加蒸餾水0.4mL,混勻后于25℃,16000rpm離心10min,取上清測(cè)定(動(dòng)物組織等蛋白含量較高的樣本建議離心20-30分鐘)。

  2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入0.6mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);加蒸餾水0.4mL,混勻后于25℃,16000rpm離心10min,取上清測(cè)定。

  3. 血清:直接測(cè)定。

測(cè)定操作


空白管

測(cè)定管

樣品(μL)


40

試劑一(μL)

40


試劑二(μL)

40

40

試劑三(μL)

60

60

試劑四(μL)

60

60

充分混勻,25℃反應(yīng)20min,于微量石英比色皿/96孔板,測(cè)定390nm處吸光值,記為A空白管和A測(cè)定管,△A=A測(cè)定管-A空白管。空白管只要做一管。

計(jì)算公式

a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.3635x+0.0205,R2 = 0.9986

1. 按照蛋白含量計(jì)算

VB6含量(μg/mg prot)=(△A - 0.0205)÷ 0.3635×V反總÷(V樣×Cpr)

= 13.76×(△A - 0.0205)÷ Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算

VB6含量(μg/g)=(△A - 0.0205)÷ 0.3635×V反總÷(V樣×W÷V樣總)

= 13.76×(△A - 0.0205)÷ W

3. 按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

VB6含量(μg/104 cell)=(△A - 0.0205)÷ 0.3635×V反總÷(V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總)

= 13.76×(△A - 0.0205)÷ 細(xì)胞數(shù)量

4. 按照液體體積計(jì)算

VB6含量(μg/mL)=(△A - 0.0205)÷ 0.3635×V反總÷V樣

= 13.76×(△A - 0.0205)

V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;:V樣:加入樣本體積,0.04mL;V樣總:加入提取液體積,1mL; Cpr:蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g

b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.1818x+0.0205,R2 = 0.9986

1. 按照蛋白含量計(jì)算

VB6含量(μg/mg prot)=(△A - 0.0205)÷ 0.1818×V反總÷(V樣×Cpr)

= 27.52×(△A - 0.0205)÷ Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算

VB6含量(μg/g)=(△A - 0.0205)÷ 0.1818 ×V反總÷(V樣×W÷V樣總)

= 27.52×(△A - 0.0205)÷ W

3. 按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

VB6含量(μg/104 cell)=(△A - 0.0205)÷ 0.1818×V反總÷(V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總)

= 27.52×(△A - 0.0205)÷ 細(xì)胞數(shù)量

4. 按照液體體積計(jì)算

VB6含量(μg/mL)=(△A - 0.0205)÷ 0.1818×V反總÷V樣

=27.52×(△A - 0.0205)

V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;:V樣:加入樣本體積,0.04mL;V樣總:加入提取液體積,1mL; Cpr:蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g

注意事項(xiàng)

  1. 若測(cè)定結(jié)果中吸光值超過(guò)1,請(qǐng)將樣本稀釋后進(jìn)行測(cè)定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

  2. 蛋白濃度較高的樣品,比如動(dòng)物組織,若顯色完成后有沉淀產(chǎn)生,將樣本稀釋后再測(cè)定,在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

  3. 顯色完成后立即進(jìn)行測(cè)定。


上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國(guó)內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

  2. 國(guó)外試劑的訂購(gòu)。可提供歐美實(shí)驗(yàn)室品牌的采購(gòu)方案。

  3. 提供加急物流處理,進(jìn)口貨物,最快交期1-2周。

  4. 進(jìn)出口貨物代理服務(wù)。

  5. 公司代理眾多有名生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點(diǎn)合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 質(zhì)量保證,所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅(jiān)持“一站式"服務(wù)模式,為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國(guó)際與國(guó)內(nèi)資源,加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)建設(shè),提高公司內(nèi)部運(yùn)作效率,為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運(yùn)作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

維生素B6測(cè)試盒




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