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上海牧榮生物科技有限公司

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細胞解離試劑的選購

閱讀:758      發布時間:2023-12-18
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為還原貼壁細胞(例如上皮細胞)表型的天然環境,通常會將它們接種到經組織培養物處理的表面上,并在此附著存活和增殖。  如需進行增殖、計數和下游分析,必須解離貼壁細胞和來自實體組織的細胞,形成懸浮液。  單細胞懸液是細胞計數、傳代培養再接種和細胞測定/分析必需成分。 

解離試劑包括天然存在的酶、較為溫和的非酶替代物;也可通過螯合鈣防止鈣粘蛋白的附著而實現解離,從而將細胞與表面或相互脫離。細胞解離試劑可能對細胞外基質(ECM)底物具有特異性。

我們全面的細胞解離試劑產品線包括:

  • 胰蛋白酶:用于常規細胞分離的動物來源、重組型和StableCell 胰蛋白酶

  • 胰蛋白酶-EDTA和EDTA溶液

  • ECM特異性膠原酶、彈性蛋白酶、分散酶

  • Accumax和Accutase非酶溶液


胰蛋白酶,重組胰蛋白酶,STABLECELL™胰蛋白酶

胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶,是常用的貼壁細胞系和組織解離酶之一。粗制胰蛋白酶制劑通常同時適用上述兩種應用,但胰蛋白酶濃度過高或細胞孵育時間過長時,可能會損傷細胞膜并殺死細胞。從培養基質上解離培養細胞的常用方法是聯合使用胰蛋白酶和EDTA(乙二胺四乙酸)處理,其中胰蛋白酶濃度范圍為0.025%至0.5%。

和標準胰蛋白酶溶液一樣,StableCell 胰蛋白酶溶液專用于細胞解離,但無需分液、冷凍和解凍。由于不再需要分液及等待胰蛋白酶解凍,此溶液為細胞傳代或相關實驗節省了大量時間,也騰出了更多寶貴的實驗室冷柜空間。建議2-8 °C儲存我們的StableCell™胰蛋白酶溶液,但我們自己開展的研究證明,37 °C儲存的StableCell™胰蛋白酶仍可保留>90%的活性和性能。

膠原蛋白酶和分散酶

膠原蛋白酶可切割天然三螺旋膠原蛋白中的肽鍵。由于具有水解天然膠原蛋白的能力,其廣泛用于動物組織細胞分離。膠原蛋白酶存在于多種微生物和不同的動物細胞中。膠原蛋白酶是由厭氧細菌溶組織梭狀芽孢桿菌分泌的“粗制"膠原酶。

分散酶是一種快速、有效、溫和且中性的蛋白酶,可培養物中的完整上皮薄層與基質的。分散酶I用于消化肺組織和處理細胞,適用于流式染色和鼠CD4 T細胞的分離。

特殊培養物解離試劑

針對需要更為溫和酶活性的細胞和組織,可采用濃度更低、效率更高的AccumaxAccutase酶溶液酶溶液解離或分離。上述溶液:

  • 可有效分離胚胎和神經干細胞

  • 解離溫和,可保留細胞活力并增加細胞產量

  • 無需中和


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