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人纖維母細胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒實驗使用說明書

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  人纖維母細胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒的實驗使用說明書通常包含以下關鍵內容:

  一、產品基本信息

  ?產品名稱?:人纖維母細胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒

  ?英文名稱?:Human Fibroblast surface protein, FSP ELISA Kit 或 FSPELISAKit

  BS-1421 人纖維母細胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒 廠家:天津本生

  ?規格?:通常有48T和96T兩種規格

  ?用途?:僅限科研實驗,不用于臨床診斷

  二、實驗原理

  ELISA試劑盒基于固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA)。已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用產生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系。

  三、樣本收集與處理

  ?血清?:使用不含熱原和內毒素的試管,避免任何細胞刺激。收集血液后,離心分離血清和紅細胞(如1000×g離心10分鐘)。

  ?血漿?:可使用EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。離心取上清(如1000×g離心30分鐘)。

  ?細胞上清液?:離心去除顆粒和聚合物(如1000×g離心10分鐘)。

  ?組織勻漿?:將組織加入適量生理鹽水搗碎,離心取上清(如1000×g離心10分鐘)。

  四、樣本保存

  樣本收集后應及時檢測。

  若不及時檢測,應按一次用量分裝,并凍存于-20℃或更低溫度,避免反復凍融。

  解凍時應在室溫下進行,并確保樣品均勻充分地解凍。

  五、實驗步驟

  ?標準品稀釋與加樣?:在酶標包被板上設標準品孔,加入不同濃度的標準品。

  ?加樣?:設空白孔和待測樣品孔,加入樣品稀釋液和待測樣品。

  ?溫育?:用封板膜封板后置于適宜溫度(如37℃)溫育一定時間(如30分鐘)。

  ?洗滌?:揭掉封板膜,棄去液體,加入洗滌液洗滌多次。

  ?加酶?:每孔加入酶標試劑(空白孔除外)。

  ?再次溫育和洗滌?:重復溫育和洗滌步驟。

  ?顯色?:加入顯色劑A和B,避光顯色一定時間(如15分鐘)。

  ?終止?:加入終止液終止反應。

  ?測定?:在酶標儀上測定各孔的吸光度(OD值)。

  六、結果判斷

  根據標準品的濃度和對應的OD值繪制標準曲線,然后根據待測樣品的OD值在標準曲線上查找對應的濃度。

  七、注意事項

  實驗過程中應嚴格按照說明書操作。

  注意避免交叉污染和實驗誤差。

  不同批次的試劑盒可能存在差異,使用前應仔細閱讀說明書并進行預實驗。

  請注意,不同品牌和供應商提供的試劑盒可能在具體細節上有所不同,因此在使用前應詳細閱讀該試劑盒的說明書并遵循其指導進行操作。

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