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如何避免液相色譜柱的損壞呢？
如何避免液相色譜柱的損壞呢？
在液相色譜的使用中，我們會發現很多實驗室會面臨色譜柱頻繁損壞的問題。
損壞的來源
先來了解一下色譜柱的損壞來源于哪些方面：
1泵頭密封圈的磨損
2進樣閥轉子密封圈的磨損
3析出的緩沖鹽
4樣品中的復雜易吸附基質，柱壓過高等。
其實，在工作過程中大多數的顆粒物堵塞導致的色譜柱背壓升高問題是體現在柱頭堵塞。
而樣品的易吸附機制也可能會和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發生作用導致色譜柱背壓升高。
但是這種情況在較低的PH系統中會有所改變，因為較低的PH系統會降硅膠表面的硅醇基發生解離。
5柱效低
可能是色譜柱被污染、 過濾片部分堵塞、色譜柱內的死體積造成，
例如流動相pH值或者組成不適造成固定相損失。流動相變化快，造成固定相物理損壞，機械振動造成固定相產生裂縫，柱床收縮或干枯。也有可能是儀器連接的問題，認真檢查進樣器、檢測器、管路、保護柱和在線過濾器等是否連接好，也可能是色譜柱沒有平衡好， 進樣量過大等問題。
6重復性差、不出峰、回收率低
可能是色譜柱被污染，流動相p H值或者組成不適造成固定相損失 ，樣品溶劑不同或樣品本身不穩定，固定相極性過強或者流動相極性過弱．或者發生非特異性吸附。也可能梯度實驗時平衡時間不足，溫度波動，流動相組成改變，樣品溶劑不同， 樣品穩定性不好，方法的開發不好，緩沖液的酸堿度不合適或者緩沖能力不足。
防護措施
為了降色譜柱的損耗問題，我建議大家在使用色譜柱時可以做一些防護。例如：
1在液相系統中加入在線過濾器
在線過濾器的內顆粒空隙一般是0.5微米，對于UHPLC會選擇0.2微米空隙的在線過濾器。這個空隙尺寸和柱頭的過濾篩板尺寸接近或者略小。
不同公司的在線過濾器
所以，在線過濾器能夠有成果的阻擋來自樣品、泵頭密封墊、自動進樣器的轉子密封墊的顆粒物，以防柱頭過濾篩板的堵塞。
注意：但是對于低死體積的液相系統，在線過濾器的加入可能會導致系統死體積大峰展寬變嚴重的問題。而對于大多數的液相系統而言，色譜圖不會有太大變化。
2在柱子前端使用保護柱
保護柱有很多種，通用型、一體式、卡套式，但是它其實是一個和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。
因為它具有和分析柱相同的內填料，所以保護柱可以阻擋顆粒物，還可以阻擋易吸附的樣品基質組分。
不同公司的保護柱
注意：由于保護柱中可能有大量的強保留組分，在用強溶劑清洗系統時請取下保護柱，以防這些強保留組分被洗脫進分析柱。保護柱如果出現吸附飽和也可能會對分離成果有影響。
3對樣品進行凈化處理
有一些液相的分析方法沒有明確標注樣品的凈化，但我希望大家在做分析時能夠考慮樣品的凈化，常用的方案是對樣品進行過濾。
色譜柱的儲存
在實際工作中，色譜柱的儲存也會影響柱子的使用壽命。那么對于色譜柱的儲存，也有以下建議：
短期儲存時
應該保存在接近常用的流動相條件下。并且，要把系統中的緩沖鹽、酸等移除。
長期儲存時
按照說明書的要求將色譜柱保存在對應的溶劑中，并且將色譜柱從系統中取下兩頭用堵頭堵死。